甲型肝炎灭活疫苗（Vero细胞）生产工艺研究

作     者：魏巍 

作者单位：吉林大学 

学位级别：硕士

导师姓名：孔维;徐艳君

授予年度：2007年

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 10[医学] 

主      题：甲肝灭活疫苗 Vero细胞 生产工艺 

摘      要：甲型肝炎(甲肝)是由甲肝病毒(HAV)引起的,是各种肝炎中流行面积最广、发病率最高的疾病,接种甲肝疫苗是预防甲肝的有效措施。临床应用表明,甲肝疫苗是安全的,免疫原性极佳,疫苗应用前景广阔。 现应用甲肝疫苗多采用减毒株灭活制成,安全可靠,但制备工艺复杂,价格昂贵。因此,改变生产工艺,降低成本,生产更优质的甲肝疫苗将是不断探索的新方向。 本研究采用Vero细胞生产的甲肝灭活疫苗经培养、收获、提纯、甲醛灭活等工艺制成。 采用BL-08株甲型肝炎病毒按适宜稀释后接种单层Vero细胞,置35℃培养12-14天。收获病毒后,采用DEAE Sepharose FF阴离子交换层析、Sepharose 4FF凝胶层析等方法对初步提取自Vero细胞内的甲型肝炎病毒进行分部纯化,后加入终浓度为1/4000甲醛溶液于37℃持续振摇灭活。然后采用DEAE Sepharose FF阴离子交换层析柱经基础平衡液、阶段洗脱后,分别收集甲型肝炎病毒抗原,加入非活性成分后,冻干制成甲肝疫苗。 该甲型肝炎灭活疫苗(Vero细胞)的生产工艺路线稳定、可行,为甲肝的大规模生产提供了可靠的依据。