抗HER-2工程抗体chA21对人卵巢癌SKOV3裸小鼠移植瘤的抑制作用及其机制

作     者：凌晓光 

作者单位：安徽医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：吴强;程联胜;孟刚

授予年度：2006年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主      题：chA21 SKOV3细胞 卵巢癌 移植瘤 HER-2 免疫组织化学 TUNEL 扫描电镜 凋亡 侵袭 组织芯片 Ki-67 NFκB Bcl-2 Fas Bax caspase 3 MMPs TIMPs E-cad VEGF 

摘      要：目的：观察抗HER-2工程抗体chA21对高表达HER-2的人卵巢癌SKOV3裸小鼠移植瘤的抑制作用，并初步探讨其可能的作用机制。方法：成功建立人卵巢癌SKOV3裸小鼠移植瘤模型后，随机将荷瘤裸鼠分为阴性对照NS组12只，chA21组6只和阳性对照药Herceptin组6只共3组。chA21和Herceptin均按30mg·kg体重每周两次静脉注射，观察肿瘤生长变化，连续给药6周后，处死全部荷瘤裸鼠，计算抑瘤率;观察肿瘤组织的病理变化，AB／PAS染色观察肿瘤组织中黏液的分泌;应用HE染色、透射电镜和TUNEL等技术观察chA21对肿瘤细胞凋亡的影响;并利用组织芯片及免疫组化方法结合显微图像分析系统定量检测肿瘤组织中：1)细胞增殖指标Ki-67和NFκB的表达;2)凋亡相关基因Bax、Bcl-2、caspase 3及Fas蛋白的表达;3)与侵袭相关因子MMPs、TIMPs、VEGF及E-cad的表达。结果：chA21以30mg·kg体重每周2次尾静脉注射给药：1)能显著抑制高表达HER-2的人卵巢癌SKOV3细胞裸小鼠移植瘤的生长，其抑瘤率为30.53％。2)能下调移植瘤细胞Ki-67和NFκB的表达。3)HE染色光镜观察chA21组移植瘤细胞出现聚巢倾向，并有腺样结构形成趋势，AB／PAS染色见细胞内AB阳性物质增多;细胞膜表面的E-cad表达增强。4)HE染色和透射电镜均能观察到chA21组移植瘤细胞出现凋亡现象;且chA21组移植瘤细胞凋亡指数显著高于NS组。5)chA21组移植瘤细胞Bax、Fas和caspase 3的表达增加，Bcl-2和NFκB的表达及Bcl-2／Bax比值下降。6)chA21组移植瘤细胞MMP-2、MMP-9和VEGF的表达下降，而TIMP-1、TIMP-2及E-cad的表达增加，MMP-2／TIMP-2和MMP-9／TIMP-1的比值下降。结论：1)抗HER-2工程抗体chA21能够抑制人卵巢癌SKOV3裸小鼠移植瘤的生长。其可能的机制是通过抑制NFκB的表达，下