福氏志贺菌血清型PCR检测方法及血清型相关噬菌体SfX研究
作者单位:中国疾病预防控制中心
学位级别:硕士
导师姓名:徐建国
授予年度:2010年
学科分类:100208[医学-临床检验诊断学] 1002[医学-临床医学] 10[医学]
主 题:福氏志贺菌 血清型 分子标识 PCR 血清型转化噬菌体
摘 要:福氏志贺菌是发展中国家细菌性痢疾的主要病原菌。根据O抗原的不同,福氏志贺菌分为X、Y、1a、1b、1c、2a、2b、3a、3b、4a、4b、5a、5b、Xv和6共15个血清型6,7。除血清6型外,其它血清型O抗原都具有相同的四糖骨架,在骨架的不同糖基上进行糖基或/和乙酰基修饰,导致菌株表面不同的型抗原(如Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ,Ⅴ)和群抗原(如3,4;7,8;6)的出现。这种修饰作用是介导糖基转移和乙酰化的基因gtrA、gtrB、gtr(Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅹ)和/或oac完成的。这些基因位于噬菌体上,称之为血清型转换噬菌体。本研究针对福氏志贺菌O抗原修饰基因,建立了检测福氏志贺菌血清型的PCR方法。我们建立的PCR检测福氏志贺菌血清型方法,能够检测14个福氏志贺菌的血清型,包括1a、1b、2a、2b、3a、3b、4a、4b、5a、Y、X和Xv。本方法与传统的使用诊断血清凝集试验检测的方法相比,较好的避免了交叉反应问题,而且经济简便,具有很好的应用前景。 本研究还从福氏志贺菌Xv血清型菌株2002017中成功诱导得到噬菌体SfX。通过和400余个噬菌体的全基因组比较发现,福氏志贺菌血清转换噬菌体SfX和沙门氏菌O抗原修饰噬菌体P22密切相关。进一步比较发现,这些噬菌体可能和福氏志贺菌不同血清型的流行强度有关。