1、四川地区汉族人群Rh（D）变异体分子机制研究 2、四川地区汉族人群真正Rh阴性个体基因多态性研究

作     者：李宏 

作者单位：北京协和医学院 

学位级别：硕士

导师姓名：陈静娴;陈强;郑忠伟

授予年度：2010年

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 071007[理学-遗传学] 

主      题：D变异体 弱D表型 部分D表型 Del表型 新等位基因 RhD阴性 表型 基因型 多态性 遗传背景 

摘      要：第一部分四川地区汉族人群Rh(D)变异体分子机制研究 [目的]研究和分析四川地区汉族人群Rh(D)变异体的多态性和分子机制。为本地区的Rh(D)变异体研究填补空白,并为Rh血型的准确鉴定和临床输血提供理论基础和指导。 [方法]首先对所有样本采用血型血清学的方法鉴定,初筛阴性的样本先采用间接抗球蛋白法,以确定弱D或部分D型别样本,剩余样本再用吸收放散法,分析Del型别。此外,对样本的表型进行鉴定。用序列特异性引物-聚合酶链反应方法,对上述样本进行分型确认。未能分型成功的疑难样本进行PCR产物直接测序检测,测序结果和GenBank上标准序列进行比对,以确定变异体的类别。对其杂合性采用PCR-SSP的方法进行检测。 [结果]血清学试验检出D抗原变异型52例,经分子生物学方法检测分析,弱D15RHD(G282D)型4例,弱D12RHD(G277E)型1例,弱DRHD(L320L)1例(型别未定),弱DRHD(G263R)1例(型别未定),部分D DVI typeⅢ型2例,DELRHD(K409K)型41例,DELRHD(MlI)型1例,此外发现新等位基因RHD (A237D) 1例(基因序列号:GU998825)。RHD杂合性检测结果显示1例弱D15和9例DELRHD(K409K)型样本为RHD+/RHD+纯合子,其他均为RHD+/RHD-杂合型。 [结论]四川地区汉族人群Rh(D)变异体有丰富的类型和不同分子机制 第二部分四川地区汉族人群真正Rh阴性个体基因多态性研究 [目的]对四川地区汉族人群RhD阴性个体的基因多态性进行研究. [方法]用PCR-SSP及基因序列测定技术对经间接球蛋白试验(IAT)、吸收放散试验检测均为阴性的样本进行分型。 [结果]86例RhD阴性的样本中,包括RHD基因完全缺失个体68例、16例携带RHD-CE(2-9)-D等位基因、1例携带RHD-CE(8-9)-D等位基因、1例携带RHD(711DelC)等位基因。 [结论]四川地区汉族人群RhD阴性个体分子机制具有丰富的多态性和不同的遗传背景,其主要为RHD全缺失为主,其次为RHD-CE(2-9)-D型,并存在其他稀有的基因型。