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广州地区rhd阴性献血者Del表型及基因型分析

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中国输血杂志 2024年第8期37卷 859-865页

作者：黄伯泉贾双双温机智陈景旺罗广平姬艳丽广州血液中心广州市血液安全重点实验室广东广州510095

目的研究广州地区rhd阴性献血者D放散型(Del)分布、表型及基因型以了解本地区DEL血型分子生物学背景。方法对2021年11月1日—2022年6月30日期间广州地区献血者采用盐水法初筛为rhd阴性血液进行间接抗人球蛋白试验(IAT)血清学确认、采用R... 详细信息

目的研究广州地区rhd阴性献血者D放散型(Del)分布、表型及基因型以了解本地区DEL血型分子生物学背景。方法对2021年11月1日—2022年6月30日期间广州地区献血者采用盐水法初筛为rhd阴性血液进行间接抗人球蛋白试验(IAT)血清学确认、采用RhCE分型卡确定RhCE表型,对1146例确认rhd阴性所有C+(n=459)以及随机抽取部分C-标本(n=175)进行吸收放散(Del)筛查(共634例);提取Del阳性标本DNA进行高分辨熔解曲线分析法(HRM)实时荧光PCR检测rhd基因c.1227位点基因情况;对HRM检测rhd^(*)1227位点无突变标本采用限制性片段多态性聚合酶链反应(PCR-RFLP)扩增后产物作PstⅠ酶切,进行电泳分析rhd基因合子型;sanger法进行rhd基因进行外显子测序(exon 1-10),采用SeqMan软件分析基因突变情况;采用第3代单分子测序技术对可疑Del阳性标本进行rhd全基因分析。结果634例确认rhd阴性标本吸收放散试验结果显示Del表型占36.1%(229/634),占总rhd确认阴性的20%(229/1146);229例DEL的RhCE分型分别为Ccee 181例,CCee 40例,CcEe 7例,ccEe 1例,HRM结合rhd盒子型分析结果显示170例rhd基因为rhd^(*)1227A/01N.01、32例为rhd^(*)1227A/1227G,26例为rhd^(*)1227A/1227A、6例为rhd^(*)1227G/1227G(其rhd基因测序结果显示1例为弱D12型、4例为D-和1例rhd^(*)01EL.02)。结论广州地区献血者DEL个体基因型以rhd^(*)1227A/01N.01为主且其RhCE表型均为C+的特征;HRM可作为常规筛查“亚洲型”DEL血型基因的分子生物学方法。

关键词：无偿献血者 rhd阴性 “亚洲型”DEL RhCE表型高分辨熔解曲线法(HRM)

北京地区初筛rhd阴性人群血清学和rhd基因分型特征研究

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中国输血杂志 2024年第8期37卷 872-878,885页

作者：宋轲马春娅罗圆圆于洋中国人民解放军总医院第一医学中心输血医学科北京100853

目的研究北京地区初筛rhd阴性人群rhd基因分型,分析不同基因型的血清学特征及Rh表型分布规律。方法收集本院2022年8月—2024年1月通过微板法或微柱凝集法初筛rhd阴性标本204例,使用盐水试管法进行Rh抗原表型鉴定,微柱凝集-间接抗人球蛋... 详细信息

目的研究北京地区初筛rhd阴性人群rhd基因分型,分析不同基因型的血清学特征及Rh表型分布规律。方法收集本院2022年8月—2024年1月通过微板法或微柱凝集法初筛rhd阴性标本204例,使用盐水试管法进行Rh抗原表型鉴定,微柱凝集-间接抗人球蛋白技术进行rhd阴性确认试验,PCR-SSP法和测序技术进行rhd基因分型检测,计算各表型频率和基因频率。结果204例初筛rhd阴性标本Rh血清学表型分布为ccee 112例(54.90%)>Ccee 73例(35.78%)>CCee 9例(4.41%)>ccEe 6例(2.94%)>CcEe 4例(1.96%)。本研究共检出7种rhd基因型,检出数量由高至低依次为129例(63.24%)rhd^(*)01N.01、44例(21.57%)rhd^(*)01EL.01、26例(12.75%)rhd^(*)01N.03、2例(0.98%)rhd^(*)01N.16、1例(0.49%)rhd^(*)06.03.01、1例(0.49%)weak rhd^(*)15,1例(0.49%)rhd^(*)13.01/rhd^(*)01N.01。Rh血型抗原基因频率及表型分布,符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05)。结论北京市初筛rhd阴性人群rhd基因具有多态性,最常见的rhd阴性基因型为rhd^(*)01N.01,rhd变异型为rhd^(*)01EL.01。该研究可为临床实施基因型匹配输血提供数据支持。

关键词： rhd阴性 rhd基因基因分型基因频率北京

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rhd阴性初筛样本的血清学和基因分型结果

临床检验杂志 2012年第3期30卷 224-226页

作者：周毓菁王雪明袁异玮蒋敏顾国浩李勇张健郑元苏州大学附属第一医院检验科江苏苏州215006 江苏大学基础医学与医学技术学院江苏镇江212013

目的了解初筛rhd阴性血液样本的血清学和基因分型检测结果。方法对107例初筛为rhd阴性血液样本,用间接抗人球蛋白试验(IAT)检测弱D型,用吸收放散试验检测DEL型。对3例弱D型、28例吸收放散试验阳性和35例吸收放散试验阴性的标本进行基因... 详细信息

目的了解初筛rhd阴性血液样本的血清学和基因分型检测结果。方法对107例初筛为rhd阴性血液样本,用间接抗人球蛋白试验(IAT)检测弱D型,用吸收放散试验检测DEL型。对3例弱D型、28例吸收放散试验阳性和35例吸收放散试验阴性的标本进行基因分型检测。结果 107例初筛为rhd阴性的样本用血清学方法检出3例弱D型(2.8%);吸收放散试验检测出阳性30例(28.0%),阴性74例(69.2%)。基因分型结果表明,3例弱D型中2例为rhd阳性,1例为弱D15型;对74例吸收放散试验阴性标本中的35例进行了基因分型,其中rhd阴性28例(80.0%),rhd-CE(2-9)-D型5例(14.3%),DEL 1227A型2例(5.7%);rhd DEL型基因分型检测结果表明,28例吸收放散阳性标本中DEL 1227A型19例(67.9%),未能分型5例(17.9%),未出现条带4例(14.3%)。用rhd阴性鉴定基因分型检测试剂盒对4例未现条带者进行基因分型,结果为弱D15型1例,rhd阴性2例,rhd阳性1例;初筛rhd阴性样本中,血清学检出率为69.2%,基因分型检出率为57.3%,差异无统计学意义(χ2=1.78,P>0.05)。结论初筛为rhd阴性样本中rhd基因存在多态性,DEL 1227A型是DEL型的主要等位基因。

关键词： rhd阴性 DEL型弱D型基因分型

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rhd阴性患者的输血方法及对策

中国输血杂志 2013年第2期26卷 167-168页

作者：付军解放军153医院输血科河南郑州450042

rhd阴性血型在我国汉族人群中仅占0．2％～0．4％，在临床输血中供需矛盾十分突出，近年来国内媒体时有rhd阴性患者在遇失血性休克这一危及生命的紧急情况下，未能及时输血而死亡的报道，也有rhd阴性患者择期手术没有同型血而无法按期... 详细信息

rhd阴性血型在我国汉族人群中仅占0．2％～0．4％，在临床输血中供需矛盾十分突出，近年来国内媒体时有rhd阴性患者在遇失血性休克这一危及生命的紧急情况下，未能及时输血而死亡的报道，也有rhd阴性患者择期手术没有同型血而无法按期手术的情况。我院输血科既是军队采血机构，又是医院的临床供血科室，具有采血，供血双重职能。

关键词：患者 rhd阴性输血

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rhd阴性患者紧急输血应急预案探讨

中国输血杂志 2011年第9期24卷 792-793页

作者：郭祥萍文军新疆医科大学第二附属医院新疆乌鲁木齐830063 新疆维吾尔自治区人民医院

Rh血型系统是红细胞血型系统中最复杂的1个血型系统。包括D、C、c、E、e抗原,天然产生的Rh抗体者极少,绝大多数Rh抗体都是由于输入Rh血型不合的血液或胎母Rh血型不合的妊娠等免疫引起。

关键词：血型抗原 rhd阴性输血应急预案

rhd阴性血型抗原分析在临床输血安全中的应用研究

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检验医学 2011年第2期26卷 105-107页

作者：陈荣仓陈筱华林碧孔令光黄国永刘保林甄伟春林杰温州市中心血站浙江温州325027

目的从临床输血安全的研究角度,实施有效的管理和应用,指导对rhd阴性血型稀有血液资源的保存与实用性稀有血型库的建立。方法采用瓷板法对rhd抗原进行初筛,rhd初筛阴性的血液标本,用间接抗人球蛋白法(IAT)进行确认试验;rhd确认阴性的试... 详细信息

目的从临床输血安全的研究角度,实施有效的管理和应用,指导对rhd阴性血型稀有血液资源的保存与实用性稀有血型库的建立。方法采用瓷板法对rhd抗原进行初筛,rhd初筛阴性的血液标本,用间接抗人球蛋白法(IAT)进行确认试验;rhd确认阴性的试验标本再进行吸收和放散试验;再用盐水试管法对RhC、Rhc、RhE和Rhe抗原的鉴定。结果从165 041名献血者初筛出651名rhd抗原阴性者,其中rhd阴性抗原确认为633名,弱D型为18名,在633名rhd抗原阴性献血者中,ABO血型分布为:O型(36.81%)(A型(30.49%)>B型(26.07%)(AB型(6.63%);rhd阴性血型抗原表现型以ccdee(59.08%)和Ccdee(30.96%)居多,其次为CCdee、ccdEe、CcdEe、CCdEe、CcdEE和ccdEE表现型,未见CCdEE表现型。从整体随机抽取确认为阴性的316名献血者中共检测出DEL型71名,所占比例为22.47%。结论把O型CCdEE和ccdEE表现型红细胞,在工作中发现后及时冻存并在临床上针对使用,在建立使用型稀有血型库和解决临床对特殊血型的需求具有实际的临床应用意义。

关键词： rhd阴性血型抗原应用

青岛地区rhd阴性及D变异型无偿献血者rhd基因的多态性研究

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中华医学遗传学杂志 2017年第6期34卷 897-900页

作者：胡彬冯智慧朱于莉山东省青岛市中心血站 266071

目的探讨青岛地区rhd阴性及D变异型无偿献血者的分子机制与rhd基因的多态性。方法对220例经血清学试验确证为阴性及5例D变异型的无偿献血者，采用PCR—SSP方法检测rhd基因的第1-10外显子，对全部或部分外显子扩增阳性的样本进行测序分... 详细信息

目的探讨青岛地区rhd阴性及D变异型无偿献血者的分子机制与rhd基因的多态性。方法对220例经血清学试验确证为阴性及5例D变异型的无偿献血者，采用PCR—SSP方法检测rhd基因的第1-10外显子，对全部或部分外显子扩增阳性的样本进行测序分析。结果在220例确证试验阴性的样本中，rhd基因第1-10外显子检测全部为阴性的样本有166例（75．45％），部分或全部存在的标本有54例（24．55％）。共获得8种等位基因型，分别为rhdl227G-A28例（12．73％）、rhd-CE-（2—9）-D19例（8．64％）、rhd-CE-（3-7）-D1例（O．45％）、rhd3G〉A1例（0．45％）、rhd 711delC 2例（0．91％），rhd1013T〉C1例（0．45％），rhd1227A／G1例（O．45％）。rhd基因第1-10外显子未发现突变者1例。5例D变异的个体共有2种等位基因型，分别为rhd845G：〉A（4例）和rhd697G〉A（1例）。结论青岛地区rhd阴性无偿献血者的rhd基因以整体缺失为主，并存在丰富的遗传学多态性。

关键词： rhd阴性 D变异型 rhd基因青岛地区

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rhd阴性个体rhd基因分型方法的研究及rhd阴性伴抗-D个体的分子生物学特征初探

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RhD阴性个体RHD基因分型方法的研究及RhD阴性伴抗-D个体的分子生...

作者：戈勇华中科技大学

学位级别：硕士

【目的】本实验目的是探讨一种简便的适合汉族人的rhd基因分型方法，并应用该方法初步分析rhd阴性伴抗-D个体的分子生物学特征，为指导rhd阴性患者合理用血及rhd阴性产妇产后是否要进行rhd免疫球蛋白干预治疗提供初步的理论依据。【方... 详细信息

【目的】本实验目的是探讨一种简便的适合汉族人的rhd基因分型方法，并应用该方法初步分析rhd阴性伴抗-D个体的分子生物学特征，为指导rhd阴性患者合理用血及rhd阴性产妇产后是否要进行rhd免疫球蛋白干预治疗提供初步的理论依据。【方法】1)利用PCR-SSP技术对116例标本rhd特异性外显子7和内含子4进行筛查。2)对内含子4和外显子7筛查为阴性标本运用PCR-SSP技术检测rhd基因启动子和外显子10。3)对外显子7和内含子4阳性及启动子和外显子10筛查阳性的标本进行rhd特异性的外显子3、4、5、6、7、9检测。4)内含子4和外显子7为阳性的标本使用BAGene rhd-TYPE Asia试剂盒检测rhd(K409K)。5)通过PCR-SSP的方法对检测出的rhd(K409K)标本进行验证。【结果】1)116例标本中，有83例为rhd基因缺失，占71.5%,有8例为rhd基因外显子2缺失，占6.9%，有24例为DEL(K409K)，占20.7%，2)抗-D组23例标本均为rhd基因缺失。3)在27例无抗D组中，10例为DEL,2例rhd外显子2缺失，15例rhd基因缺失。【结论】1)本基因分型方法简便，可快速对rhd阴性标本中rhd基因进行初步分型。2)rhd基因缺失为rhd阴性血型的主要分子生物学特征。3)DEL为rhd阴性血型的次主要分子生物学特征。4)携带DEL的个体是否可以接收rhd阳性输血及DEL孕妇产后是否需要接受抗D免疫球蛋白预防注射还需进一步研究。

关键词： rhd阴性基因分型抗-D DEL

中国江苏地区汉族rhd阴性个体RHCE基因型多样性研究

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中国实验血液学杂志 2014年第5期22卷 1428-1431页

作者：陈青肖建宇郁心黄成垠姚根宏江苏省血液中心江苏南京210042 无锡市红十字中心血站江苏无锡214021 南京大学医学院附属鼓楼医院风湿免疫科江苏南京210008

本研究探究中国江苏地区血清学rhd阴性献血者中,含有rhd基因的献血者和不含rhd基因献血者中的RHCE基因型。采用聚合酶链式反应-序列特异性引物(PCR-SSP)方法分析337例血清学rhd阴性无偿献血者的RHCE基因型;同时采用PCR-SSP扩增这些献血... 详细信息

本研究探究中国江苏地区血清学rhd阴性献血者中,含有rhd基因的献血者和不含rhd基因献血者中的RHCE基因型。采用聚合酶链式反应-序列特异性引物(PCR-SSP)方法分析337例血清学rhd阴性无偿献血者的RHCE基因型;同时采用PCR-SSP扩增这些献血者rhd基因特异性位点。结果表明:337例血清学rhd阴性,其中rhd基因阳性献血者RHCE*C/C 20例,RHCE*C/c 62例,RHCE*c/c 24例,RHCE*C及RHCE*c基因频率分别为0.4811和0.5189;RHCE*E/E 0例,RHCE*E/e 25例,RHCE*e/e 81例,RHCE*E及RHCE*e基因频率分别为0.1179和0.8821。231例rhd基因阴性献血者中RHCE*C/C 3例,RHCE*C/c 34例,RHCE*c/c 194例,RHCE*C及RHCE*c基因频率分别为0.0866,0.9134;RHCE*E/E 0例;RHCE*E/e 15例;RHCE*e/e 216例;RHCE*E及RHCE*e基因频率分别为0.0325,0.9675。结论:在中国江苏地区rhd基因阴性人群中,RHCE基因主要以RHCE*ccee为主。中国江苏地区血清学rhd阴性的献血者中,RHCE基因型在含有rhd基因组和不含rhd基因组存在统计学差异。

关键词： rhd阴性 RHCE基因型基因频率