蛋白激酶C-α在重组血管抑素抑制兔耳创面愈合中的作用

作     者：潘丽 

作者单位：兰州大学 

学位级别：硕士

导师姓名：张选奋

授予年度：2013年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100210[医学-外科学(含：普外、骨外、泌尿外、胸心外、神外、整形、烧伤、野战外)] 10[医学] 

主      题：蛋白激酶C 血管抑素 创面愈合 血管增生 

摘      要：目的研究PKC-a在重组血管抑素（Recombinant Human Angiostatin, rh-AS）（K1-3）影响兔耳皮肤创面愈合和血管增生中的作用。 方法构建兔耳腹侧皮肤创面愈合模型。创面分别给予PBS液（对照组）、rh-AS（K1-3）（rh-AS组）、PMA （PMA组）、Go6983（Go6983组）、rh-AS联合PMA （rh-AS+PMA组）和rh-AS联合Go6983（rh-AS+Go6983组）湿敷,每日1次,连续13-16天（上皮化）。分别于伤后3天、7天、11天,采集创面图像,用Image-Pro Plus6.0图像处理软件计算创面愈合率,并记录各组创面愈合时间。于伤后第3天、7天、11天、上皮化时切取创面标本,采用CD34免疫组化染色检测微血管密度变化,用免疫组化方法半定量检测各时间点创面组织中PKC-a表达情况。创面愈合时间、创面愈合率、微血管密度及PKC-a阳性细胞比例均采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD法检验,若方差不齐则采用Kruskal-Wallis检验;P0.05表示差异有统计学意义。 结果1rh-AS组和G66983组创面愈合时间长于对照组而PMA组创面愈合时间短于对照组（P0.05）;rh-AS组创面愈合时间长于rh-AS+PMA组,但较rh-AS+Go6983组缩短（P0.05）;PMA组创面愈合时间短于rh-AS+PMA组（P0.05）;G66983组创面愈合时间较rh-AS+Go6983组缩短（P0.05）。 2.伤后第3天各组间创面愈合率无差异（P0.05）。伤后第7天：rh-AS组、G66983组创面愈合率小于对照组,而PMA组则高于对照组（P0.05）;rh-AS组创面愈合率低于rh-AS+PMA组,而高于rh-AS+Go6983组（P0.05）;PMA组创面愈合率高于rh-AS+PMA组（P0.05）;G66983组创面愈合率高于rh-AS+Go6983组（P0.05）。伤后第11天：rh-AS组、G66983组创面愈合率低于对照组（P0.05）,PMA组高于对照组（P0.05）;rh-AS组创面愈合率高于rh-AS+Go6983组（P0.05）;PMA组创面愈合率高于rh-AS+PMA组（P0.05）;Go6983组创面愈合率高于rh-AS+Go6983组（P0.05）。 3.微血管密度测定：伤后3天、7天、11天各组创面比较,rh-AS组、G66983组、rh-AS+PMA组、rh-AS+Go6983组微血管密度小于对照组（P0.05）,PMA组血管增生显著高于对照组及其余各组（P0.05）。各组创面上皮化时,新生血管也随之退化：各组微血管密度下降,但PMA组微血管密度仍高于各组（P0.05）。 ***-α广泛表达于创面组织细胞,随创面愈合过程进展,各组PKC-α表达增强,阳性细胞（成纤维细胞、内皮细胞、表皮细胞）比例增加。同一时间点组间比较,rh-AS组PKC-α表达水平与对照组无差异（P0.05）,PMA组、rh-AS+PMA组各时间点PKC-α阳性细胞比例均高于对照组和rh-AS组,Go6983组、rh-AS+Go6983组低于对照组和rh-AS组（P0.05）。 结论1.血管抑素抑制创面愈合过程中血管增生,延迟创面愈合。2. PKC-α不介导血管抑素对创面愈合及血管增生的抑制作用。3.蛋白激酶C活化剂PMA促进创面愈合,而抑制剂Go6983延迟创面愈合。