转化生长因子β1对眼眶成纤维细胞增殖和胶原合成作用的实验研究

作     者：高自清 

作者单位：南京医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：刘庆淮

授予年度：2005年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100212[医学-眼科学] 10[医学] 

主      题：转化生长因子β1 眼眶成纤维细胞 体外培养 增殖 胶原合成 增殖性玻璃体视网膜病变 

摘      要：目的:研究转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)对体外培养的人眼眶成纤维细胞(orbital fibroblasts,OFs)增殖及其胶原合成的影响,探讨TGF-β在增殖性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy,PVR)发病机制中的作用。方法:眼眶成纤维细胞取自眼外伤后眼球摘除欲行义眼台植入的病例,术中取眼眶内瘢痕结缔组织进行成纤维细胞原代培养,体外传代培养后用不同浓度TGF-β(0.1、1.0、5.0、10.0、100.0μg/L)对细胞进行处理,采用绘制细胞生长曲线;椎虫蓝染色计算活细胞比例、MTT比色法测定光吸收值(A值);H-TdR掺入法测定细胞放射性强度,流式细胞仪(flow cytometer,FCM)检测细胞周期分布的方法研究细胞增殖。用H-Pro掺入法测定细胞放射性强度来判断细胞胶原合成。结果:0.1μg/L、1.0μg/L、5.0μg/L、10μg/L浓度的TGF-β作用后较无TGF-β作用时人眼眶成纤维细胞的生长曲线上移,活细胞数增加,细胞光吸收值上升,H-TdR及H-Pro摄入量增加,处于增殖期(S+G)的细胞比例增多。100μg/L浓度的TGF-β作用后结果相反。结论:TGF-β对人眼眶成纤维细胞增殖有双相调节性,其不同作用的发挥依赖TGF-β的浓度。TGF-β的促成纤维细胞增殖和促胶原合成作用可能在增殖性玻璃体视网膜病变的发生机制中起重要作用。