心衰患者循环血中miRNA-423-5p的表达及诊断价值分析

作     者：王尔辉 

作者单位：南华大学 

学位级别：硕士

导师姓名：陈伟新

授予年度：2018年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

主      题：miRNA-423-5p 心力衰竭 实时荧光定量 高通量测序 

摘      要：目的:先使用高通量测序法对心衰患者循环血中miRNAs进行测序,后使用qRT-PCR技术验证,观察循环血miRNA-423-5p在心力衰竭患者中表达变化,利用受试者工作曲线(ROC曲线)评估循环血miRNA-423-5p作为诊断心力衰竭分子标志物的价值。方法:(1)选取2014年7月-2015年11月来深圳市孙逸仙心血管医院就诊的心力衰竭患者共144人(其中缺血性心衰78例,非缺血性心衰66例),正常对照53例。其中高通量测序阶段共选取缺血性心衰8例、非缺血性心衰8例和健康人8例;qRT-PCR验证阶段选取缺血性心肌病心力衰竭70例、非缺血性心肌病心力衰竭58例和健康人45例。(2)标本收集与保存:使用0.11M的柠檬酸钠抗凝剂对静脉血抗凝,2000g离心标本15分钟后保留血浆,温度-80摄氏度保存备用。(3)使用高通量测序法对标本测序筛查,将2个心衰组检测结果与正常对照组对比计算出差异表达,P0.05为统计学上有显著性差异。(4)使用RT-PCR技术检测循环血miRNA-423-5p和内参U6表达水平。(5)统计学分析:采用SPSS 19.0统计软件进行数据统计分析,用ROC曲线及其曲线下面积(AUC)评估miRNA-423-5p对心衰的诊断价值。结果:(1)与正常组比较,miRNA-423-5p在缺血性心衰升高4.176倍,miRNA-423-5p在非缺血性心衰升高14.264倍。(2)miRNA-423-5p的AUC值为0.776,具有中等诊断价值。结论:心力衰竭时循环血miRNA-423-5p表达增高,miRNA-423-5p可能是诊断心力衰竭潜在的一个分子生物学标志物。