DNA分子标记技术在海带种质鉴定中的应用

作     者：赫英俊 

作者单位：中国科学院海洋研究所 

学位级别：硕士

导师姓名：段德麟;张大明

授予年度：2000年

学科分类：090801[农学-水产养殖] 0710[理学-生物学] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 081704[工学-应用化学] 0908[农学-水产] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 09[农学] 

主      题：海带 配子体 DNA RAPD ISSR AFLP SCAR 

摘      要：本文在CTAB和SDS/K+两种DNA提取方法基础上，综合与改 进，建立了海带配子体DNA的提取和纯化方法。用此法得到了较高 质量的海带配子体DNA，可有效地应用于海带分子标记的研究。采 用RAPD，ISSR和AFLP三种DNA分子标记技术对海带配子体细胞 系进行了种质鉴定和评价，结果表明： 1）RAPD方法可以有效地应用于海带配子体细胞系的鉴定，用 三个RAPD引物（OPC20，OPD20和OPD15）构建的DNA指纹图谱， 不仅能将23个海带配子体细胞系区分开，而且能将每种海带的雌、 雄配子体区分开。 2）在没有其它海带配子体DNA分子标记背景资料的前提下，运 用ISSR标记方法，辅证了RAPD方法的有效性及可靠性，排除了因 原核生物的“污染，所造成的RAPD标记方法的干扰，同时，也能 辨别非海带配子体，这可以评价海带配子体保存的实际效果。 3）AFLP分子标记结果表明，海带配子体细胞系具有高的多态性， 这对海带具体性状进行连锁标记分析，可能是有效的方法。 4）在RAPD标记的基础上。初步建立海带配子体SCAR标记， 为海带分子标记辅助选种、育种打下基础。 5）对3F、5F、12M三个实验材料，进一步用rDNA转录间隔区 （ITS1）测序分析，与已知海带配子体ITS1的差别很大，说明不是海带 配子体。 综合上述，RAPD，ISSR和AFLP三种DNA分子标记技可以对 海带种质资源进行鉴定、评估，为海带科学保种、选种提供依据。