江西猪源产ESBLs ETEC流行及质粒相关性研究

作     者：左明开 

作者单位：江西农业大学 

学位级别：硕士

导师姓名：王萍

授予年度：2016年

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

主      题：猪源ETEC ESBLs 药敏试验 质粒 

摘      要：近年来,产超广谱β-内酰胺酶（Extended Spectrum Beta-Lactamases,ESBLs）在猪源大肠杆菌中广泛流行,赋予细菌多重耐药性,给耐药性大肠杆菌防控工作带来巨大挑战。产肠毒素大肠杆菌（ETEC）是养猪业最常见的致病性大肠杆菌之一。江西是我国养猪大省,了解ESBLs在江西猪源ETEC的流行及其介导的耐药具有重大意义。本研究以从江西规模化养猪场腹泻仔猪直肠拭子中分离的146株大肠杆菌为受试菌。首先采用PCR和纸片法对ETEC和产ESBLs ETEC进行鉴定,并进行药敏试验。结果:***检出率为65.07%（95/146）,产ESBLs ETEC检出率为20.55%（30/146）;***对林可霉素、四环素、甲氧苄啶、头孢氨苄和阿莫西林耐药率均超过90%,分别为100.00%、94.74%、94.74%、91.58%和90.53%。对亚胺培南、头孢西丁、头孢他啶、头孢吡肟和氨曲南敏感;3.产ESBLs ETEC对β-内酰胺类抗生素的耐药率整体远高于非产ESBLs ETEC,非β-内酰胺类抗生素耐药情况相近。其次运用PCR方法对产ESBLs ETEC进行ESBLs分型、质粒分型和细菌进化分群研究。结果:***、CTX-M、SHV和OXA型ESBLs均有检出,检出率分别为70.00%、63.33%、16.67%和13.33%;2.共检出FIB、I1、HI2、FIA、Y、FIC、FrepB和N8种不同类型质粒复制子。产ESBLs ETEC以FrepB、FIB和I1型质粒为主,分别占66.67%、60.00%和46.67%。非产ESBLs ETEC除N和I1型质粒复制子检出率较低,为13.33%外,其余质粒复制子检出率在33.33%3.33%之间;3.细菌进化分群研究发现,产ESBLs ETEC多为A群ETEC,占46.67%（14/30）。非产ESBLs ETEC各进化群所占比例相仿,A群占16.67%。最后,将ESBLs阳性质粒转至Top10感受态细胞,对转化子进行药敏试验。结果:共计获得19株转化子,这些转化子具有原菌株全部或部分耐药性。本研究夯实了我国猪源产ESBLs ETEC研究基础,丰富了江西产ESBLs ETEC研究数据,为进一步研究产ESBLs ETEC耐药机制和耐药修复奠定了理论基础。