人组织型激肽释放酶基因6在脑胶质瘤中的表达及生物学意义

作     者：娄江涛 

作者单位：辽宁医学院 

学位级别：硕士

导师姓名：胡成进

授予年度：2011年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主      题：K LK6 胶质瘤 RT-PCR U251 

摘      要：目的 脑胶质瘤是最常见的颅内肿瘤,起病隐匿,浸润性生长,与正常脑组织没有明显界限,难以完全切除,晚期治疗效果差。同时大多数胶质瘤缓慢发病,自出现症状至就诊时间一般为数周至数月,少数可达数年,而临床上缺少能够早期诊断、疗效观察和预后判断的生物学标志。KLK6是组织型激肽释放酶基因家族成员之一,与多种肿瘤关系密切。同时它在中枢神经系统中表达活跃,并与多种神经退行性疾病存在相关性。本实验旨在探讨KLK6基因在胶质瘤组织和瘤旁组织中的表达及其与胶质瘤临床病理特征的关系,并观察胶质瘤细胞株U251中KLK6基因被沉默后细胞增殖活性、增殖周期和凋亡的变化。 方法 应用实时荧光定量PCR检测39例胶质瘤切除组织及11例瘤旁组织中KLK6基因mRNA的表达量,并分析其与患者性别、胶质瘤组织病理分型和病理分期的关系;另外,以体外化学合成针对人KLK6基因的siRNA转染胶质瘤细胞株U251,观察KLK6基因被沉默后对U251细胞生长的影响,RT-PCR法检测KLK6 mRNA表达的变化,CCK-8检测法观察RNA干扰对肿瘤细胞增殖活性的影响,FCM分析细胞周期和凋亡变化。 结果 11例胶质瘤组织中KLK6mRNA表达量与其相应瘤旁组织相比表达下调(-3.44±1.45/-2.81±1.57,P0.05);胶质瘤U251细胞转染siRNA后,KLK6 mRNA表达明显下调,干扰率达到81.14%。胶质瘤U251细胞株KLK6基因被干扰沉默后,细胞增殖活性增强(P0.05)。 结论 KLK6mRNA在胶质瘤组织表达下调,体外U251细胞株KLK6基因表达被沉默后肿瘤细胞生长加快,提示KLK6可能对胶质瘤的生长起抑制性作用。