99mTc标记T7肽用作肿瘤新生血管整合素αvβ3受体显像剂的生物分布研究

作     者：郝玉美 

作者单位：北京协和医学院 

学位级别：硕士

导师姓名：宋娜玲;贺欣;王德芝

授予年度：2014年

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100106[医学-放射医学] 10[医学] 

主      题：肿瘤血管新生 99mTc-T7肽 整合素αvβ3 生物分布 受体显像剂 

摘      要：肿瘤的发生与转移依赖于肿瘤血管新生,整合素αvβ3受体在肿瘤新生血管和部分肿瘤细胞表面呈高水平表达,已被证实在肿瘤血管新生、肿瘤的生长和转移过程中发挥着重要作用,且肿瘤分子水平的变化往往早于其组织和功能方面的变化,据此可将这一极具前景的靶受体用于肿瘤早期显像,并进行抗肿瘤血管新生药物的药效研究。 T7肽是来源于肿瘤抑素(Tumstatin)Ⅳ型胶原蛋白的25肽,序列为Thr-Met-Pro-Phe-Leu-Phe-Cys-Asn-Val-Asn-Asp-Val-Cys-Asn-Phe-Ala-Ser-Arg-Asn-A sp-Tyr-Ser-Tyr-Trp-Leu (TMPFLFCNVNDVCNFASRNDYSYWL),T7肽具备分子量小(2.75kD,M=2800)、免疫原性低、亲脂性强、结合位点和活性明确等优点,可通过非RGD依赖模式与整合素αvβ3受体特异性结合并抑制肿瘤血管新生,是一个极具潜力的肿瘤靶向分子探针。 本研究的目的是探索将T7肽用做整合素avβ3受体显像剂的可行性。首先通过流式细胞技术(Flow Cytometry, FCM)检测人正常微血管内皮细胞HMEC,脑胶质瘤细胞U251、食管癌细胞EC109、喉癌细胞Hep2、肝癌细胞HepG2.肺癌细胞NCI-H157、NCI-H460、A549、乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231和前列腺癌细胞PC3等多种肿瘤细胞表面的整合素αvβ3受体表达情况,筛选出高表达整合素αvβ3受体的肿瘤细胞株构建裸鼠肿瘤动物模型。采用羰基锝法标记T7肽,并采用尾静脉注射方式(Intravenous injection, iv)注射到裸鼠肿瘤模型体内,检测99mTc-T7肽在裸鼠肿瘤模型体内肿瘤以及非肿瘤部位的生物分布、肿瘤/非肿瘤组织放射性比值等特性,观察99mTc-T7是否能够在肿瘤部位聚集,以及其在裸鼠模型体内的药代动力学特性。 本研究通过FCM对多种肿瘤细胞表面整合素αvβ3表达量检测结果分析,发现非小细胞肺癌NCI-H157细胞表面高表达整合素αvβ3受体。用非小细胞肺癌NCI-H157细胞构建了裸鼠非小细胞肺癌模型(Non-small cell lung caner, NSCLC)。通过99mTc标记T7肽,及对99mTc-T7在NSCLC模犁体内的生物分布数据分析,发现99mTC对T7肽标记产率高,放化纯达90%以上,且体外稳定性良好。99mTc7在裸鼠模型体内的肿瘤部位有一定程度的聚集,肿瘤/肌肉的放射性比值(T/NT)随时间延长而增加,可以达到5以上,且在4h-8h之间取值较为理想。本研究的结果表明99mTc-T7有望用作整合素αvβ3受体显像剂,进行肿瘤早期显像,并为抗肿瘤血管新生药物的药效评估提供新途径。