异丙肌苷片临床药代动力学研究

作     者：杨俊凤 

作者单位：吉林大学 

学位级别：硕士

导师姓名：顾景凯

授予年度：2015年

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100706[医学-药理学] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：异丙肌苷 肌苷 对乙酰氨基苯甲酸 二甲氨基异丙醇 药代动力学 液相色谱-质谱联用 

摘      要：本研究建立了测定人体血浆中肌苷、对乙酰氨基苯甲酸及二甲氨基异丙醇的液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)分析方法,根据测定结果绘制药-时曲线,计算药动学参数,阐明中国健康受试者口服异丙肌苷片后的药代动力学特征,为异丙肌苷片的临床合理用药提供依据。本研究建立了同时测定人体血浆中肌苷、对乙酰氨基苯甲酸的LC-MS/MS分析方法。取血浆样品经蛋白沉淀方法处理后,以乙腈为有机相,5 mmol/L醋酸铵水溶液为水相,采用梯度洗脱的方式,用SUPELCO Ascentis(?)Express C18柱(4.6×150mmI.D.,5μm)进行分离,流速为0.8mL/min。选用配有电喷雾离子源的三重四极杆串联质谱仪,以多重反应监测(MRM)方式进行负离子检测,用于定量分析的离子反应分别为m/z 267.2→ m/z 143.9(肌苷)、m/z 178.2→ m/z 133.8(对乙酰氨基苯甲酸)和m/z 211.1→m/z 166.9(内标联苯乙酸)。肌昔线性范围为30-1000 ng/mL,定量下限为30 ng/mL;对乙酰氨基苯甲酸的线性范围为10-10000 ng/mL,定量下限为10 ng/mL。本研究按照相关规定做了全面的方法学验证,结果表明本方法准确度、精密度、方法专属性、样品稳定性、提取回收率和基质效应等均符合要求。本研究建立了单独测定血浆中二甲氨基异丙醇的LC-MS/MS分析方法。取血浆样品经蛋白沉淀方法处理后,以甲醇为有机相,10 mmol/L醋酸铵水溶液为水相,采用梯度洗脱的方式,用SUPELCO Ascentis(?)C18柱(4.6×50mm I.D.,5μm)进行分离,流速为1 mL/min。选用配有电喷雾离子源的线性离子阱质谱仪,以多重反应监测(MRM)方式进行正离子检测,用于定量分析的离子反应分别为m/z 103.9→m/z71.1(二甲氨基异丙醇)和 m/z285.2→m/z193.1(内标地西泮)。二甲氨基异丙醇的线性范围为50-3000 ng/mL,定量下限为50 ng/mL。本研究按照相关规定做了全面的方法学验证,结果表明本方法准确度、精密度、方法专属性、样品稳定性、提取回收率和基质效应等均符合要求。基于建立的LC-MS/MS方法,对异丙肌苷片在健康受试者体内的药代动力学进行研究。肌苷为内源性物质,血药浓度稳定在一定的范围内,约100-400ng/mL,不参与药代参数的计算。对乙酰氨基苯甲酸、二甲氨基异丙醇的药代参数如下:口服0.5 g异丙肌苷片后,对乙酰氨基苯甲酸、二甲氨基异丙醇的AUC0-t分别为 3555.1 ± 2469.68 μg/L·h 和 4458.32 ± 1299.07 μg/L·h;Cmax分别为 3390.5 ±3949.62 ng/mL和 1080.9 ± 384.93 ng/mL;T1/2分别为 1.15 ± 0.57 h 和 3.61 ± 0.93 h;Tmax为0.83 ±0.31 h和1.18 ±0.55h。口服1.0 g异丙肌苷片后,对乙酰氨基苯甲酸、二甲氨基异丙醇的 AUC0-t分别为 7912.17 ± 4483.07 μg/L·h和 7656.68 ±2259.36 μg/L·h;Cmax 分别为 7042.00 ± 2610.86 ng/mL 和 2081.00 ± 694.14 ng/mL;T1/2 分别为 1.15 ±0.42 h 和 4.36 ±1.68h;Tmax为 0.63 ±0.18 h 和 0.73 ±0.18 h。口服2.0 g异丙肌苷片后,对乙酰氨基苯甲酸、二甲氨基异丙醇的AUC0-t分别为18153.28 ± 11416.54 μg/L·h和 13924.42 ± 2598.47 μg/L·h;Cmax 分别为 14838.00 ±11703.67 ng/mL 和 3227.5 ± 964.61 ng/mL;T1/2 分别为 1.45 ± 0.69 h 和 3.55 ± 0.81h;Tmax为0.95±0.48h和1.13±0.48h。高脂肪餐饮食影响试验中,对乙酰氨基苯甲酸、二甲氨基异丙醇的 AUC0-t 分别为 4150.37 ± 2076.22 μg/L·h 和 7243.55 ±2697.51 μg/L·h;Cmax 分别为 1997.10 ± 1459.85 ng/mL 和 1497.20 ± 609.23 ng/mL;T1/2 分别为 1.23 ± 0.62 h 和 3.76±0.80 h;Tmax 为 1.58 ± 0.83 h 和 1.90 ± 0.94 h。连续7天口服1.0 g异丙肌苷片后,对乙酰氨基苯甲酸、二甲氨基异丙醇的AUC0-t分别为 9473.08 ± 3823.29 μg/L·h 和 9791.53 ± 36