退变椎间盘终板软骨中HMGB1与MMP-9表达及相关性研究

作     者：曹启斌 

作者单位：昆明医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：舒钧

授予年度：2012年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100210[医学-外科学(含：普外、骨外、泌尿外、胸心外、神外、整形、烧伤、野战外)] 10[医学] 

主      题：HMGB1 MMP-9 椎间盘退变 终板软骨 

摘      要：目的： 研究高迁移率蛋白1(High mobility group box-1, HMGB1)与基质金属蛋白酶-9(Matrix metalloproteinase-9, MMP-9)在兔退变椎间盘终板中表达相关性及意义。 方法： 建立椎间盘退变动物模型：采用日本大耳兔经前外侧入路行椎间盘纤维环穿刺建立腰椎椎间盘退变模型,在不同的时间点处死兔子获取标本,完整取出手术干预椎间盘作为模型组、取未行手术干预腰段椎间盘为对照组。通过大体标本组织及HE染色组织学角度来观察,来验证不同时间点退变椎间盘模型的建立。以双重免疫组化染色方法对退变椎间盘组织中HMGB1与MMP-9阳性表达行定性、定位检测,并对免疫组化切片阳性表达率分析,所得数据应用SPSS13.0统计软件进行统计学分析。 结果： 1组织切片HE染色结果：对照组椎间盘结构良好。4周龄组受干预椎间盘内见纤维环结构紊乱,软骨终板细胞层次不清;8周龄组髓核皱缩,纤维环出现破裂,部分软骨终板钙化层增厚。12周龄组软骨终板钙化层明显增厚、骨化,与软骨终板相邻的髓核明显退变并纤维化。 2对照组免疫组化双染结果：在对照组的兔椎间盘终板中HMGB1有少量表达,MMP-9无表达或极弱表达,表达位于细胞内,细胞基质内无表达。 3模型组免疫组化双染结果：造模后的初期(四周),在椎间盘双重免疫组化双染切片上可以见到HMGB1和MMP-9共同表达在部分细胞,单一因子表达的细胞很少见,阳性细胞周围基质中也可以见到有散在HMGB1、MMP-9表达;造模的后期(八周、十二周),HMGB1和MMP-9共同表达的细胞逐渐增多,大部分细胞内见HMGB1和MMP-9共同表达;表达HMGB1细胞多的地方,表达MMP-9的细胞也多,大部分阳性细胞周围基质中也可见HMGB1、MMP-9同时表达。 结论： 1、应用椎间盘纤维环穿刺法能够成功建立兔椎间盘相应节段退变模型。 2、HMGB1的持续升高与椎间盘退变加重有关： 3、HMGB1可能是MMP9持续升高的重要原因之一,MMP-9的持续升高与其正反馈调节可能有密切关系。 4、HMGB1对MMP-9的正反馈调节作用和程度可能与椎间盘退变有密切关系。