僧帽牡蛎天然活性肽组分BPO-1诱导人胃腺癌BGC-823细胞凋亡作用与机理研究

作     者：李鹏 

作者单位：厦门大学 

学位级别：硕士

导师姓名：李祺福

授予年度：2002年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主      题：海洋生物活性物质 僧帽牡蛎 天然活性多肽 胃癌细胞 细胞凋亡 

摘      要：采用酸抽提、凝胶柱层析、SDS-PAGE 等方法，从僧帽牡蛎(Saccostrea cucullata)体内分离提取到牡蛎天然活性多肽组分(BPO-1，Bioactive Peptides of Oyster in Peak I)，处理人胃腺癌BGC-823细胞，观察研究BPO-1对胃癌细 胞的生物学效应，以细胞凋亡诱导物姜黄素和癌细胞分化诱导物HMBA为平行对 照，比较研究BPO-1对人胃腺癌BGC-823细胞的生物学效应，并进一步探索其对 胃癌细胞的作用机理。 实验结果表明，40μg／mL 的BPO-1 能有效抑制BGC-823细胞增殖活动，细胞 生长受到明显抑制，细胞分裂指数下降。免疫细胞化学观察显示，经40μg／mL BPO-1 处理后的BGC-823细胞，碱性磷酸酶活性下降。光镜、透射电镜观察显示经处理 后的BGC-823细胞趋于固缩状态，细胞体积减小，核膜崩解，细胞核出现断裂现 象形成多个小体，异染色质增多且多为凝聚状态，细胞质空泡化明显，出现凋亡 小体等典型的细胞凋亡形态和超微结构特征。流式细胞仪检测和DNA电泳实验显 示BGC-823细胞经BPO-1、 姜黄素及其组合处理后，亚G1期细胞增多，出现DNA 降解，细胞进入凋亡。BPO-1这一作用与10μg／mL姜黄素对BGC-823细胞的凋亡 作用一致，且BPO-1与姜黄素联合处理作用更强，而与HMBA诱导BGC-823细胞的 分化作用不同。免疫细胞化学检测显示，BPO-1、 姜黄素及其组合均能不同程度地 上调BGC-823细胞p16、 c-myc、Fas、p21AFI/CIPI 蛋白表达，下调突变型p53、 bcl-2 蛋白表达。 研究结果表明，BPO-1 能有效抑制人胃腺癌 BGC-823 细胞恶性增殖活动，改 变人胃腺癌细胞代谢相关酶活性和肿瘤相关抗原表达，改变人胃腺癌细胞的恶性 形态与超微结构特征，并诱导胃癌细胞周期发生变化，出现亚G1期，从而对胃癌 细胞具有显著的诱导凋亡作用。其诱导癌细胞作用机理与调节和干预bcl-2、 c-myc 等癌基因、p53、 p16、 p21AFI/CIPI等抑癌基因的表达有关。