内源性大麻素的检测及应用
作者单位:东南大学
学位级别:硕士
导师姓名:邓慧华
授予年度:2017年
学科分类:081704[工学-应用化学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 1010[医学-医学技术(可授医学、理学学位)] 070302[理学-分析化学] 0703[理学-化学] 10[医学]
主 题:高效液相色谱串联质谱 头发 唾液基质 AEA 2-AG PTSD 肥胖
摘 要:以往检测头发和唾液中内源性大麻素(即AEA和2-AG)的方法主要存在以下局限。第一、在碱性条件下提纯,易使o-AEA转化为AEA,以及2-AG异构化为1-AG或3-AG;第二、使用外标法定量,易受到基质效应的影响,不能可靠、准确的定量内源性大麻素含量;第三、方法检测限高、头发样品使用量多和前处理过程繁琐。最近的研究在中性环境下提纯内源性大麻素,有效的减少了o-AEA转化成AEA以及2-AG的异构化。鉴于此,本研究旨在建立前处理更简单、检测限更低、灵敏的检测头发和唾液中内源性大麻素的方法。进而,用于人群样本检测,探讨AEA和2-AG含量与PTSD、肥胖之间的联系。首先,分别使用20mg和15mg头发,采用中性环境下提纯(即经甲醇孵育,采用固相萃取柱提纯头发AEA和2-AG),而后采用大气压化学电离正离子模式和多反应监测方式下定性分析,以内标法定量分析。这两种方法的回收率在98.7-109.0%之间,日内、日间变异系数均小于10.0%,均符合检测标准要求。其次,使用500μL唾液,用乙酸乙酯液液萃取提纯唾液待测物,采用大气压化学电离正离子模式和多反应监测方式下定性分析,以内标法进行定量分析。该方法的回收率在95.9-109.0%之间,日内、日间变异系数均小于10.0%,符合检测标准要求。最后,人群分析发现,在地震发生4.5、5.5和6.5年后,PTSD患者和非PTSD患者之间头发中AEA和2-AG含量差异均不显著(ps0.05)。肥胖者唾液和头发AEA和2-AG含量均显著高于非肥胖者(ps0.01)。另外,头发2-AG有相对较强的跨时间稳定性,而AEA较弱。