福建省三元区并殖吸虫病疫源地调查和泡囊狸殖吸虫独立性的研究

作     者：张世阳 

作者单位：福建医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：许龙善;李友松

授予年度：2005年

学科分类：1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 100401[医学-流行病与卫生统计学] 10[医学] 

主      题：并殖吸虫 斯氏狸殖吸虫 泡囊狸殖吸虫 疫源地 虫种独立性 

摘      要：目的:研究福建省三元区并殖吸虫病疫源地的虫种分布和人群感染情况,并通过形态观察和分子生物学鉴定研究泡囊狸殖吸虫的独立性。方法:按常规方法对三元区进行肺吸虫病流行病学调查,并对采集的螺、蟹标本作并殖吸虫尾蚴及囊蚴的检查与观察。提取斯氏狸殖吸虫囊蚴、泡囊狸殖吸虫囊蚴的基因组DNA,用特异引物、PCR扩增其ITS2基因并将PCR扩增产物纯化后测序,然后通过GenBank的Blast程序分析基因序列的同源性,并应用MEGA3.0软件中的ME程序构建种系发生树。结果:检查放逸短沟蜷654只、洱海螺新种468只和235只沼螺,未检出并殖吸虫尾蚴。充当第二中间宿主的福建华溪蟹、福建马来溪蟹、角肢南海溪蟹检出并殖吸虫囊蚴,感染率为44.28%(62/140),平均每只蟹和每g蟹组织携带囊蚴分别为11.03和1.24,囊蚴感染指数为6.07。2份野猫粪便中均查及并殖吸虫虫卵。人群的皮试阳性率为8.64%(21/243),皮试阳性者中血清抗体阳性率23.81%(5/21)。上述表明福建省三元区是以斯氏狸殖吸虫为主的并殖吸虫病高度疫源地。泡囊狸殖吸虫囊蚴正是在重度感染斯氏狸殖吸虫囊蚴的蟹体内才被发现。斯氏狸殖吸虫囊蚴与泡囊狸殖吸虫囊蚴形态差异明显,但观察到泡囊狸殖吸虫囊蚴在自蟹体分离后0.5～2h内有57.14%(12/21)变成同斯氏狸殖吸虫囊蚴近似的特征。基因同源性比较结果显示:泡囊狸殖吸虫与斯氏狸殖吸虫的ITS2基因同源性为100%,碱基差异为0,没有基因差异;泡囊狸殖吸虫与卫氏并殖吸虫、三平正并殖吸虫、巨睾并殖吸虫的ITS2基因同源性分别为90%、93%、92%,碱基差异分别为33、25、29,基因差异较明显。种系发生树显示:斯氏狸殖吸虫、泡囊狸殖吸虫在同一位置,与巨睾并殖吸虫、卫氏并殖吸虫、三平正并殖吸虫的遗传距离较远。结论:三元区是一个以斯氏狸殖吸虫为主的并殖吸虫病高度疫源地。虽然斯氏狸殖吸虫囊蚴和泡囊狸殖吸虫囊蚴的形态特征有较明显的区别。但经一段时间后,57.14%(12/21)的泡囊狸殖吸虫囊蚴变成斯氏狸殖吸虫囊蚴形态相似的特征。而且基因序列的同源性比较分析发现斯氏狸殖吸虫和泡囊狸殖吸虫的ITS2基因高度同源,而且种系发生树也显示二者之间无明显的遗传分化。因此,斯氏狸殖吸虫和泡囊狸殖吸虫为同一物种,泡囊狸殖吸虫为