血栓调节蛋白对肺癌细胞致瘤性和迁移的抑制作用及其机制

作     者：郑娜娜 

作者单位：苏州大学 

学位级别：硕士

导师姓名：周泉生

授予年度：2016年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主      题：肺癌 血栓调节蛋白 肿瘤发生 EMT 侵袭 转移 

摘      要：血栓调节蛋白（Thrombomodulin,TM）是血管内皮细胞膜蛋白,在抗血栓、抗炎症、血管保护等方面具有重要作用,被称为是“血管保护神。近年来有文章报道,TM在肺癌等多数肿瘤组织中被下调,且其表达水平下调与肿瘤患者预后差相关。然而血栓调节蛋白在肺癌细胞中的作用机制还不完全清楚。阿托伐他汀钙（atorvastatin,ATV）,是用于降低胆固醇的药物,目前仅有少数文章发现在人主动脉内皮细胞中,ATV可使TM表达升高,但在肺癌中ATV是否促进肺癌细胞TM表达还没有报道。因此,我们用不表达TM的肺癌细胞为模型,用不同浓度的ATV对SPC-A-1进行处理。结果表明,ATV可以诱导TM基因高表达,并能抑制SPCA-1的克隆形成能力,揭示ATV降低肺癌细胞的致瘤性。为了进一步探索TM是否有抗肺癌作用,我们将TM的cDNA稳定转入两株不表达TM的肺癌细胞95D和SPC-A-1,使TM在细胞中稳定高表达。结果表明,TM高表达显著降低肺癌细胞的生长能力,将细胞周期阻滞在G0/G1期;并且有效降低肺癌细胞的克隆形成能力。此外,TM过表达可以有效抑制肺癌细胞的迁移侵袭能力。分子机制研究发现,TM可以提高E-cadherin并降低N-cadherin的表达量,提示TM使EMT发生逆向改变,从而降低肺癌细胞的致瘤性。同时,我们将表达TM的A549肺癌细胞用TM shRNA沉默掉,发现TM抑制后,A549的迁移及侵袭能力增强,E-cadherin的表达量降低,N-cadherin的表达量升高。以上研究结果表明,ATV可能通过使TM高表达发挥抗癌作用。在肺癌的发生和发展过程中,TM可能是一个抑癌蛋白,这为以后在临床上进行TM基因治疗和采用ATV进行抗肺癌治疗,提供了新的策略和手段。