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纯钛表面微弧氧化—多巴胺-c(RGDfk)涂层对骨细胞活性转导通路影响

纯钛表面微弧氧化—多巴胺-c(RGDfk)涂层对骨细胞活性转导通路影响

作     者:全雨坚 

作者单位:佳木斯大学 

学位级别:硕士

导师姓名:李德超;李慕勤

授予年度:2018年

学科分类:08[工学] 080502[工学-材料学] 0805[工学-材料科学与工程(可授工学、理学学位)] 

主      题:环肽c(RGDfk) 信号通路 微弧氧化 黏着斑激酶 

摘      要:目的:在纯钛表面制备超声微弧氧化涂层、超声微弧氧化-聚多巴胺涂层、超声微弧氧化-聚多巴胺-环c(RGDfk)肽复合涂层,检测MC3T3-E成骨细胞在三组涂层上的增殖情况与细胞活性变化,以及与之相关的信号转导通路蛋白表达水平,研究纯钛表面微弧氧化-聚多巴胺-环c(RGDfk)复合涂层的细胞相容性,及初步探讨与之相关的可能信号转导通路,为进一步地深入研究打下基础。方法:将纯钛表面超声微弧氧化涂层设为对照组1,超声微弧氧化-聚多巴胺涂层设为对照组2,超声微弧氧化-聚多巴胺-环c(RGDfk)多肽为实验组。应用CCK-8法检测三组涂层上MC3T3-E1细胞的增殖变化;通过ALP法检测MC3T3-E1细胞在三组涂层的细胞活性情况;采用免疫印迹法(western blot法),研究MC3T3-E1在三组涂层培养后的黏着斑激酶信号通路及MAPK信号通路上的相关蛋白量表达水平。结果:在一致的培养时间下,三组涂层上的细胞均有增殖,纯钛表面微弧氧化-聚多巴胺-环c(RGDfk)多肽复合涂层的MC3T3-E1成骨细胞的增殖与活性最明显,微弧氧化-聚多巴胺组表现次之,微弧氧化组细胞增殖幅度最差;在一周时间内,随着培养时间的延长,微弧氧化-聚多巴胺-环肽c(RGDfk)复合涂层的细胞增殖幅度均比对照组1和对照组2大,细胞ALP活力表现更优。MC3T3-E1成骨细胞在该复合涂层培养后上调了黏着斑激酶MAPK信号通路上的相关蛋白的表达量,提高了sFAK水平,微弧氧化-聚多巴胺组与微弧氧化组sFAK变化差异不明显。结论:纯钛表面微弧氧化-多巴胺-环c(RGDfk)复合涂层具有良好的生物相容性,显著地促进MC3T3-E1细胞的早期增殖与细胞活性;上调了黏着斑激酶信号通路与MAPK信号通路上相关蛋白表达水平,参与细胞生命活动。

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