TRPC1对运动大鼠骨骼肌细胞凋亡的影响研究

作     者：任文宁 

作者单位：湖南师范大学 

学位级别：硕士

导师姓名：汤长发

授予年度：2012年

学科分类：0403[教育学-体育学] 040302[教育学-运动人体科学(可授教育学、理学、医学学位)] 04[教育学] 

主      题：有氧运动 骨骼肌细胞凋亡 TRPC1 TUNEL Ca2+ 

摘      要：目的：本实验通过研究中等、大强度有氧运动对大鼠骨骼肌细胞凋亡的影响,运动对TRPClmRNA的表达以及TRPCl蛋白浓度的影响,初步探讨TRPCl在运动大鼠骨骼肌细胞凋亡过程的作用,为运动训练、运动康复、运动治疗、基因治疗等提供一定的理论依据。 方法：6周龄雄性SD大鼠30只,按体重分层,随机分为对照组(NC,n=10)、中等强度有氧运动组(ME,n=10)、大强度有氧运动组(HE,n=10)。其中ME组,坡度为5°,19.3m·min-1×60min;HE组坡度为10°,26.8m·min-1×40min。NC组和有氧运动组大鼠分别于安静状态和运动后12小时乙醚麻醉断头处死,取腓肠肌和比目鱼肌。采用HE染色法观察骨骼肌细胞形态学变化;TUNEL法检测骨骼肌细胞凋亡;比色法检测骨骼肌细胞内钙离子含量;RT-PCR检测TRPClmRNA的表达;免疫印迹技术测定骨骼肌细胞中TRPCl蛋白含量。 结果：(1)组织形态学观察结果表明,比目鱼肌和腓肠肌都出现了不同程度的肌纤维排列不规则、肌纤维间的缝隙增宽等情况,大强度有氧运动组的比目鱼肌更为明显。(2)与NC、ME组相比,HE组腓肠肌的细胞凋亡指数升高,具有显著性差异(p0.05);与NC组相比,ME组比目鱼肌的凋亡指数显著升高,具有显著性差异(p0.05);与NC组相比,HE组比目鱼肌的细胞凋亡指数显著升高,具有非常显著性差异(p0.01);与ME组相比,HE组比目鱼肌的细胞凋亡指数升高,具有显著性差异(p0.05)。(3)ME组与NC组相比,腓肠肌细胞内Ca2+的含量增加了37.8%,具有显著性差异(p0.05);HE组与NC组相比,腓肠肌细胞内Ca2+的含量增加了87.9%,具有非常显著性差异(p0.01);HE组与ME组相比,腓肠肌细胞内Ca2十的含量增加了36.4%,具有显著性差异(p0.05)。与NC组相比,ME组比目鱼肌细胞内Ca2+的含量增加,具有显著性差异(p0.05),HE组比目鱼肌细胞内Ca2+的含量增加了113.6%,具有非常显著性差异(p0.01);与ME组相比,HE组比目鱼肌细胞内Ca2+的含量显著增加,具有非常显著性差异(p0.01)。(4)与NC组相比,HE组腓肠肌TRPClmRNA的表达增加、TRPC1蛋白含量增加、TRPCl/B-actin比值升高,具有非常显著性差异(p0.01);与ME组相比,HE组腓肠肌TRPClmRNA的表达增加、TRPCl蛋白含量增加、TRPCl/B-actin比值显著升高,具有显著性差异(p0.05)。与NC组相比,ME、HE组比目鱼肌TRPClmRNA的表达增加、TRPCl蛋白含量增加、TRPCl/B-actin比值升高,具有非常显著性差异(p0.01);与ME组相比,HE组比目鱼肌TRPClmRNA的表达增(?)、TRPCl蛋白含量增加、TRPCl/B-actin的表达升高,具有显著性差异(p0.05)。 结论：(1)大强度有氧运动能够较大程度的促进大鼠骨骼肌细胞凋亡,且对比目鱼肌细胞凋亡的促进程度大于腓肠肌。(2)比目鱼肌的摄钙能力比腓肠肌强,大强度有氧运动后比目鱼肌细胞内钙离子浓度最高。(3)有氧运动后骨骼肌的TRPClmRNA表达升高、TRPCl蛋白含量表达增高。(4)Ca2+可能是联系TRPCl与凋亡的纽带,TRPCl可能通过钙超载而发挥其对骨骼肌细胞凋亡的影响。