组织工程脱细胞人羊膜生物相容性的实验研究

作     者：李杨 

作者单位：天津医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：王沛;雪原

授予年度：2006年

学科分类：08[工学] 080501[工学-材料物理与化学] 0805[工学-材料科学与工程（可授工学、理学学位）] 080502[工学-材料学] 

主      题：生物相容性 组织工程 羊膜细胞 人羊膜 膜基质 免疫荧光双标 细胞层 Integrin 细胞外基质 聚集成团 

摘      要：目的 探讨脱细胞羊膜基质的生物相容性和细胞相容性。论证其作为新的骨组织工程3D基质候选物的可行性。方法将成骨细胞MC3T3-E1种植在脱细胞羊膜上,用α-MEM常规培养。在倒置相差显微镜和扫描电镜下观察细胞的形态、存活时间以及细胞分布、排列情况。使用免疫荧光和共聚焦激光扫描显微镜观察FAK、Paxillin、Integrin表达和分布情况。结果种植后12小时MC3T3-E1细胞在羊膜基质上粘附,3天长满基质。7天后,细胞分泌细胞外基质。细胞聚集成团簇样复层生长,簇间以细胞条索相互交通。且在同一时期细胞形态多样化,包括双极、多极和球形。21天时细胞开始调亡。在细胞存活时期内,细胞表达FAK(红荧光)、Paxillin(绿荧光)、Integrin(绿荧光)蛋白。主要存在细胞膜上。免疫荧光双标FAK、Paxillin和FAK、Integrin,在细胞膜上出现强共聚焦表现为黄色荧光。结论 ***3T3-E1细胞在羊膜基质上以常规培养方法培养可以存活3周,并聚集成簇复层排列,相互沟通。***3T3-E1细胞可以分泌细胞基质,在同一时段出现不同细胞周期阶段的细胞共同存在的现象。***3T3-E1细胞和脱细胞羊膜以3D粘附方式相连接。本研究提示羊膜基质有可能成为骨组织工程的新型的3D基质候选物。