盐酸贝尼地平对大鼠硝酸甘油耐受性的影响及机制研究

作     者：沈德良 

作者单位：郑州大学 

学位级别：硕士

导师姓名：阎文泰

授予年度：2004年

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100706[医学-药理学] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：硝酸甘油耐受 盐酸贝尼地平 氧自由基 丙二醛 一氧化氮 一氧化氮合酶 环磷酸鸟苷 

摘      要：1867年Brunton在爱丁堡研究证实硝酸甘油(nitroglycerin，NTG)可以用于心绞痛的治疗，至今为止NTG用于治疗缺血性心脏病和充血性心力衰竭(congestive heartfailure，CHF)的历史已经有130多年了。不过Brunton发现NTG在用于治疗心绞痛时，如果长期使用该药物必须增加剂量才能维持其疗效。相继又有很多学者在临床上利用超声学和监测血压等手段发现了这种现象，也就是后来称为的“硝酸甘油耐受。但是在临床上如治疗心血管危重症患者时，NTG必须采用持续用药的方法，那么NTG的耐受必然会限制其应用。直到目前为止，虽然经过大量的研究，NTG耐受机制仍然是个谜，所以要想从根本上改善或者是阻止NTG耐受的发生还有许多难题亟待解决。最新的研究表明，一氧化氮(nitric oxide，NO)是NTG的活性代谢产物，NO通过信号传递系统扩张血管。在发生NTG耐受的复杂过程中有几个重要的因素如神经内分泌激素系统激活、氧化应激、NTG的生物转化异常、NO信号传递系统异常、内皮功能失调，尤其是其中有关于血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ，AngⅡ)生成增加、氧自由基(superoxide anion，O)和过(氧化)亚硝酸盐生成增加、NO和内皮一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase，eNOS)含量减少以及活性降低、第二信使环磷酸鸟苷(cyclic guanosine monophosphate，cGMP)水解增加、还原型辅酶Ⅱ(reduced form of nicotinamide-adenine dinucleotide phosphate，NAD(P)H)、磷酸二酯酶(phosphodiesterase，PDE)和内皮素-1(endothelin-1，ET-1)含量和活性的异常更是现今研究的热点内容。实际上导致NTG耐受的各种机制相互交织在一起，很难找出一个统一的解释，不过若能改变它们中的一项或者多项就应该会对NTG耐受的改 郑州大学医学院2004届硕士研究生毕业论文盐酸贝尼地平对大鼠硝酸甘油耐受性的影响及机制研究 善起到相当的作用。本研究的目的是观察盐酸贝尼地平，这种新型长效二氢毗陡 类钙离子拮抗剂的非扩张血管作用对NTG耐受性的影响，并且初步探讨其机制. 方法:动物依据应用盐酸贝尼地平的时间分二大组。第一大组:各小组分别用生 理盐水或盐酸贝尼地平灌胃2周;第二大组:各小组分别用生理盐水或盐酸贝尼 地平灌胃6周。 每大组用雄性SD大鼠32只，随机分为4个小组。(1)正常对照组(C组，n 二8):不给与任何药物，但在剃过毛的胸背部放置一不含NTG的贴片空壳，并 且每日上午8点用2一3nil生理盐水灌胃。(2)盐酸贝尼地平组仍组，n=8):每 只动物每日上午8一9点给予溶解有盐酸贝尼地平6 mgl飞g的2一3rul生理盐水灌 胃，在剃过毛的胸背部放置一不含NTG的贴片空壳.(3)硝酸甘油组侧TG组，n 二8):建立NTG耐受大鼠模型。将大鼠的胸背部剃毛后，把硝酸甘油贴剂(0.05 鸣/h)贴于皮肤表面。用药时间是每日上午8点，于次日上午8点更换， 于处死前三天开始使用，而且每日上午8点用2nil生理盐水灌胃。(4)硝酸 甘油+盐酸贝尼地平组侧TG+B组，n=8):每只动物每日上午8一9点给予溶 解有盐酸贝尼地平6 mg/kg的2血生理盐水灌胃。于处死前三天开始，将大 鼠的胸背部剃毛后，把硝酸甘油贴剂(0.05吨/h)贴于皮肤表面。用药时间是每 日上午8点，于次日上午8点更换。 锤击法处死大鼠并且迅速开胸摘取大鼠的胸主动脉，轻柔修整并将其切割成 3lmn的血管环，悬挂于持续灌流37℃Kreb、液和通入95%伍巧%C02(体积分 数)混合气体的生理浴槽中，与张力换能器和二道生理记录仪连接后，平衡450 分钟。记录经10芍m。比去甲肾上腺素(no哪inephrine，NE)预收缩后动脉环对累 积浓度(10一moFL一10礴m。比)的NTG的舒张反应性曲线，测出各种浓度时舒张 反应百分率和绘制出浓度一反应曲线。其余血管组织冻存，待测血管组织中的丙 二醛(malondiaidehyde，MDA)、NO含量、NOS活性和cG入于含量。 结果:第一大组和第二大组大鼠离体主动脉环对NTG舒张血管作用的反应性， 以及血管组织中加幻OA含量、NOS活性、NO含量和cGN田含量，以及第一大组 与第二大组中NTG和NTG+B组大鼠离体主动脉环对NTG舒张血管作用的最大 舒张程度以及血管组织中NOS活性、NO含量的比较。 1.第一大组大鼠离体主动脉环对NTG舒张血管作用的反应性，以及血管组织中 郑州大学医学院2004届硕士研究生毕业论文盐酸贝尼地平对大鼠硝酸甘油耐受性的影