SAT法在骨科住院患者MRSA筛查中的应用

作     者：林洪光 

作者单位：福建医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：张文明

授予年度：2017年

学科分类：100208[医学-临床检验诊断学] 1002[医学-临床医学] 10[医学] 

主      题：实时荧光核酸恒温扩增检测 骨科 筛查 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 

摘      要：目的:了解骨科住院患者耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-Resistant Staphylococcus Aureus,MRSA)定植情况及其危险因素;探讨实时荧光核酸恒温扩增检测(Simultaneous Amplification and Testing,SAT)技术在鼻拭子MRSA检测中的应用价值。方法:收集我院2016年12月至2017年2月入院48 h内202例骨科患者鼻拭子标本。实验组采用SAT法,将磁珠法提取的靶标RNA在逆转录酶和聚合酶作用下进行RNA恒温扩增,新合成的RNA与分子信标结合后进行实时荧光检测,根据荧光扩增曲线及阈值线判定MRSA检测结果;对照组选用MRSA显色培养基鉴定法(显色法),将标本直接接种到MRSA鉴定培养基上,于37℃有氧条件下孵育48 h,依据培养基上是否出现绿色典型形态菌落判断MRSA检测结果。根据实验组和对照组的MRSA检测结果,比较SAT法和显色法检测MRSA的敏感性、特异性和阳性率等指标,分析该组病例MRSA的定植情况及其危险因素。结果:1、本课题研究的202例鼻拭子标本,采用显色法进行MRSA检测的阳性率为1.0%(2/202),SAT法的阳性率为5.4%(11/202),有9份两种方法检测的结果存在差异(均为SAT法阳性而显色法阴性),经配对χ2检验结果显示差异有统计学意义(χ2=7.11,P=0.004,即P0.05),且骨科住院患者MRSA定植的概率与病区不同无关。3、经单因素χ2检验结果显示,是否合并有糖尿病、是否有手术史与是否为MRSA定植有关,是影响MRSA定植的危险因素(P0.05),且合并有糖尿病患者MRSA定植的概率高于无糖尿病患者,且有手术史患者MRSA定植的概率高于无手术史患者。4、经多因素二项Logistic回归分析结果显示,最后纳入模型的自变量包括高血压、糖尿病、手术史3个指标(P0.05),且合并有糖尿病的患者MRSA定植的概率是无糖尿病患者的40.314倍,且有手术史的患者MRSA定植的概率是无手术史患者的8.399倍,且有高血压的患者MRSA定植的概率是无高血压患者的0.031倍。因此,合并有糖尿病和手术史是骨科住院患者MRSA定植的独立危险因素,而合并有高血压为保护因素。结论:1、SAT法能快速、准确地进行患者鼻拭子MRSA的直接检测,其敏感性、特异性、阳性率等指标均优于显色法,是一种新型、有效的MRSA检测方法。2、在本研究的骨科住院患者中,整体MRSA定植的阳性率为5.4%,糖尿病史、手术史是MRSA定植的独立危险因素,针对糖尿病史、手术史患者进行MRSA筛查可以提高成本和临床效益。