NF-κB对炎性痛及其脊髓炎症因子表达的调节

作     者：彭蓓 

作者单位：中南大学 

学位级别：硕士

导师姓名：郭曲练

授予年度：2009年

学科分类：1006[医学-中西医结合] 1002[医学-临床医学] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：CFA 单关节炎模型 PDTC 脊髓 NF-κB CX3CR1 TNF-α 

摘      要：目的本研究观察完全弗氏佐剂CFA致单关节炎模型大鼠的疼痛行为学改变,鞘内注射NF-κB抑制剂PDTC观察其对大鼠的疼痛行为学的影响,采用免疫组化检测脊髓小胶质细胞表达变化,采用RT-PCR法通过观察NF-kappaB对脊髓CX3CR1mRNA、TNF-αmRNA表达的调节来探讨NF-kappaB的调控疼痛机制以及鞘内给药的可行性。 方法48只成年SD雄性大鼠随机分为4组(n=12):(1) sham组:鞘内注射NS和PDTC(2)鞘内注射PDTC+炎性痛组:踝关节腔内注射完全弗氏佐剂前30min鞘内注射PDTC(浓度为1000Pmol每天一次)(3)炎性痛组+鞘内注射PDTC:踝关节腔内注射完全弗氏佐剂30min后给予鞘内注射PDTC1000pmol(4)炎性痛+NS组:踝关节腔内注射完全弗氏佐剂,不给予PDTC。每组注射容量都为10微升,随后用10微升的生理盐水冲管。所有药物都由生理盐水溶解以及稀释。与疼痛有关的行为学测定通过计算大鼠注射完全弗氏佐剂足疼痛行为总计反应时间来确定,将大鼠第3天后处死,用免疫组化法观察脊髓小胶质细胞的表达情况,将大鼠于第1、3、5、7天处死用RT-PCR法测定大鼠L5节段脊髓的NF-κB mRNA、CX3CR1mRNA、TNF-αmRNA的表达。 结果①鞘内注射PDTC组与致炎性痛后再给予PDTC组能引起CFA所致单关节炎模型大鼠注射足疼痛行为的总计反应时间减少;与sham组比较有显著差异(P0.05)。②与炎性痛组比较,鞘内预先注射PDTC组与致炎性痛后再给予PDTC组大鼠的脊髓背角小胶质细胞免疫反应阳性细胞数量明显减少,有显著差异(P0.05),有统计学意义。③与炎性痛组比较,鞘内预先注射PDTC组与致炎性痛后再给予PDTC组大鼠L5节段脊髓CX3CR1mRNA、TNF-αmRNA的表达明显减少,有显著差异(P0.05),有统计学意义。 结论1.鞘内注射NF-κB抑制剂PDTC可以缓解CFA所致单关节炎模型大鼠的痛觉异常。2.鞘内注射PDTC可以抑制CFA关节炎模型脊髓小胶质细胞激活和痛敏,NF-κB可能通过激活脊髓小胶质细胞参与炎性痛的形成。***-κB信号通路可能通过调节CX3CR1mRNA和TNF-αmRNA的表达参与炎性痛的形成。