枸杞、黄芪对大鼠睾丸支持细胞功能的作用探讨

作     者：赵龙坡 

作者单位：河北医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：孙辉臣;徐铮

授予年度：2006年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：枸杞 黄芪 支持细胞 抑制素 细胞增殖 抑制素βB亚基 RT-PCR 

摘      要：目的:支持细胞(Sertoli cell)是睾丸中一种有重要功能的细胞,除了对生精细胞起支持和营养作用外,Sertoli细胞还分泌雄激素结合蛋白(ABP)、抑制素(INH)、激活素(ACT)等多种因子,形成并维持有利于精子发生的微环境。越来越多的研究表明,Sertoli细胞分泌的抑制素B(INH B)是目前评价精子发生最好的内分泌标志物。枸杞、黄芪是我国传统的名贵中药材,长期以来一直被祖国医药用作补肾益气的药物,具有保护睾丸功能的作用,用于治疗和改善男性生殖功能。枸杞与黄芪对生殖功能的影响目前有一定的报道,但仅限于组织形态学方面的研究。因此我们希望将睾丸Sertoli细胞的功能与枸杞、黄芪二者的研究联合起来,从细胞和分子水平研究中药对生精功能的作用,为研究男性生殖功能调控寻找一个新思路。本研究拟将大鼠睾丸Sertoli细胞进行体外分离培养,用免疫组织化学及RT-PCR等方法检测Sertoli细胞分泌的与生精功能相关的激素—INH的表达情况,观察枸杞多糖、黄芪提取液及两药联合使用(组成杞芪合剂)对Sertoli细胞的增殖与合成INH功能的影响,为研究生精功能的调控及其机理提供基础实验依据。 方法:本研究分两部分 1大鼠睾丸Sertoli细胞的培养、鉴定与INH的表达取18—22日SD大鼠睾丸组织,采用改良的两步酶消化法分离睾丸Sertoli细胞,将获得的Sertoli细胞加入