cGMP/PKG信号通路在心肌缺血/再灌注损伤的作用机制研究

作     者：潘国焰 

作者单位：福建医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：林荣

授予年度：2013年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100210[医学-外科学(含：普外、骨外、泌尿外、胸心外、神外、整形、烧伤、野战外)] 10[医学] 

主      题：心肌缺血/再灌注损伤 cGMP/PKG信号通路 RISK信号通路 PI3K/Akt ERK1/2 细胞凋亡cGMP/PKG信号通路 mPTP GSK-3β 

摘      要：目的观察脑钠肽（brain natriuretic peptide，BNP）激活cGMP/PKG信号通路的心肌保护作用是否与PI3K、ERK1/2蛋白激酶的激活有关。 方法将84只新西兰兔随机分为7组：假手术组、对照组、BNP组、BNP+LY294002组（LY294002为磷脂酰肌醇3激酶PI3K抑制剂）、LY294002组、BNP+PD98059组（PD98059为丝裂原激活蛋白激酶MAPKK抑制剂）、PD98059组，每组12只，7组均于结扎左回旋支45min后恢复左回旋支血流，进行再灌注180min。假手术组只开胸不结扎冠状动脉;对照组再灌注前5min静脉注射生理盐水（***/min）;BNP组再灌注前5min静脉注射BNP（0.01μg/kg/min）;BNP+LY294002组再灌注前5min静脉注射BNP（0.01μg/kg/min）和LY294002(0.3mg/Kg）;LY294002组再灌注前5min静脉注射LY294002(0.3mg/Kg）;BNP+PD98059组再灌注前5min静脉注射BNP（0.01μg/kg/min）和PD98059(0.3mg/Kg）;PD98059组再灌注前5min静脉注射PD98059(0.3mg/Kg）。实验过程中记录各组缺血前、缺血45min、再灌注60min、再灌注120min及再灌注180min心率和平均动脉压;监测各组实验中心电变化及再灌注心律失常发生情况;实验终末，各组随机抽取6只兔子心脏做左室梗死面积测定，采用Evan’s blue和TTC双染色法测定心肌相对梗死面积（梗死面积占缺血危险区的百分比）;每组另外6只兔子心脏取梗死边缘区组织，Western blot方法测定P-Akt/Akt、P-ERK1/2/ERK1/2的表达。 结果1.血流动力学：心率(Heart rate，HR)和平均动脉压(Mean arterial blood pressure，MABP)在基线水平上无明显差异（P0.05）。与基线水平相比，HR和MABP在缺血以及再灌注时期有明显下降（P0.05）。 2.心律失常：与对照组相比，BNP组心律失常发生率明显减少（P0.003125）。 3.心肌梗死面积：假手术组无心肌梗死。与对照组比较，BNP组心肌梗死范围明显减少（P0.05）。 4.激酶磷酸化比例：与对照组比较，BNP组Akt、ERK1/2的磷酸化水平显著增加（P0.05）。 结论***激活cGMP/PKG信号通路对心肌缺血/再灌注损伤产生保护作用。2. cGMP/PKG信号通路的激活与RISK通路的激活有关。 目的观察BNP激活cGMP/PKG信号通路对mPTP开放和GSK-3β磷酸化的影响 方法将48只新西兰兔随机分为4组：假手术组、对照组、BNP组、BNP+KT5823组（KT5823为蛋白激酶G抑制剂），每组12只，4组均于结扎左回旋支45min后恢复左回旋支血流，进行再灌注180min。假手术组只开胸不结扎冠状动脉;对照组再灌注前5min静脉注射生理盐水（***/min）;BNP组再灌注前5min静脉注射BNP（0.01μg/kg/min）;BNP+KT5823组再灌注前5min静脉注射BNP（0.01μg/kg/min）和KT5823(1mg/Kg）。实验过程中记录各组缺血前、缺血45min、再灌注60min、再灌注120min及再灌注180min心率和平均动脉压;监测各组实验中心电变化及再灌注心律失常发生情况;实验终末，各组随机抽取6只兔子心脏做左室梗死面积测定，采用Evan’s blue和TTC双染色法测定心肌相对梗死面积;每组另外