PLCD1基因对胰腺癌细胞抑制作用的研究

作     者：胡丹 

作者单位：重庆医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：姜政

授予年度：2016年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主      题：PLCD1 胰腺癌 周期 凋亡 迁移和侵袭 

摘      要：目的:探讨pcDNA3.1-PLCD1质粒转染胰腺癌细胞CAPAN-1和BXPC-3后,对CAPAN-1和BXPC-3的PLCD1 mRNA和PLCD1蛋白表达的影响以及对CAPAN-1和BXPC-3细胞的增殖、周期、凋亡、迁移、侵袭的影响。方法:首先培养人正常胰腺导管上皮细胞株HPDE6C7和胰腺癌细胞株CAPAN-1、PANC-1、ASPC-1及BXPC-3,并提取五组细胞的RNA后逆转录,再进行PCR扩增反应筛选出低表达PLCD1的胰腺癌细胞株;再将挑选出的胰腺癌细胞株CAPAN-1和BXPC-3进行转染,实验分为pcDNA3.1-PLCD1转染组和pcDNA3.1转染组;再进行RT-PCR检测转染后CAPAN-1和BXPC-3细胞PLCD1 mRNA的表达情况,进行Western blot检测其PLCD1蛋白的表达情况,CCK-8和集落形成检测转染后细胞CAPAN-1和BXPC-3增殖情况,流式测定和分析其周期和凋亡情况,Transwell检测转染后CAPAN-1和BXPC-3的迁移及侵袭能力。结果:成功筛选出低表达PLCD1的CAPAN-1和BXPC-3细胞用于进行后续实验,CAPAN-1和BXPC-3细胞的pcDNA3.1-PLCD1转染组高表达PLCD1 mRNA和PLCD1蛋白;同时CAPAN-1和BXPC-3细胞的pcDNA3.1-PLCD1转染组可抑制细胞增殖、迁移及侵袭;另外pcDNA3.1-PLCD1转染组可促进CAPAN-1和BXPC-3细胞周期阻滞于G1期,并可促进细胞凋亡。结论:PLCD1基因可促进胰腺癌CAPAN-1和BXPC-3细胞凋亡并使细胞停在G1期,并可抑制细胞增殖、迁移及侵袭能力。