MMR、ERCC1在结直肠癌的表达及临床意义

作     者：濮娜 

作者单位：大连医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：吕申

授予年度：2013年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主      题：结直肠癌 Ki-67 hMLH1 ERCC1 免疫组织化学 

摘      要：目的：结直肠癌是常见的消化道恶性肿瘤之一。近二十年来我国结直肠癌的发病率逐年递增，居所有癌症的第三位。2012年我国新发结直肠癌患者人数已超过40万。早期发现，早期诊断，早期治疗是提高患者生存质量的关键。早期发现是早期诊断、早期治疗的基础。定期内窥镜检查、血清肿瘤标记物检测是目前早期发现的主要手段。然而，现有的结直肠癌标记物已难以满足早期诊断需要。依据肿瘤发生机制找到新的肿瘤预警标记物对早期诊断将有所帮助。大肠粘膜上皮细胞是不稳定细胞，总是处于不断的DNA合成、分裂、增殖状态，同时也不可避免受到肠内毒性物质的作用，DNA损伤不可避免。正常细胞有一套完整的DNA损伤修复系统以维护细胞基因组的稳定。错配修复(mismatch repair，MMR)和核苷酸切除修复(nucleotide excision repair，NER)是DNA修复系统中的两条重要途径。MMR系统由一组高度保守基因及其产物蛋白构成，其主要功能是纠正DNA复制、重组及基因损伤时出现的碱基配对错误。hMLH1和hMSH2是MMR系统中最为重要的两种基因。NER系统主要功能是修复那些影响区域性染色体结构的DNA损伤，涉及DNA双螺旋结构受损、紫外线导致的嘧啶二聚体及大分子致癌物导致的DNA加合物等DNA链上较大损伤。核苷酸切除修复交叉互补因子1(excision repair cross-complementingl，ERCC1)是NER系统中的标志性基因。现已证实Ki-67属于非组蛋白，表达于增殖细胞核，与细胞增殖密切相关，可作为反映肿瘤细胞增殖速度指标。本实验检测了MMR系统中hMLH1蛋白和NER系统中ERCC1蛋白在结直肠癌、癌前病变和正常大肠粘膜的表达情况，分析了其表达与肿瘤分化程度、临床分期、细胞增殖状况等患者临床病理参数间的关系，探讨这两种蛋白用于结直肠癌预警标记物的可行性。 方法：免疫组织化学方法检测结直肠癌50例，癌前病变7例与正常大肠粘膜10例的Ki-67、hMLH1和ERCC1的蛋白表达情况。Ki-67蛋白表达高低代表肿瘤细胞增殖状态。在SPSS11.5统计软件上应用卡方检验和Fisher s精确概率法分析这些蛋白表达与患者的性别、年龄及肿瘤的生长部位、病理分级、临床分期、肠壁浸润深度、淋巴结转移、细胞增殖状态的相关关系以及hMLH1与ERCC1表达间的相互关系。 结果：Ki-67蛋白表达阳性率在高分化癌、中分化癌与低分化腺癌分别为24.00%、57.90%与66.67%，Ki-67蛋白表达与肿瘤分化程度呈显著负相关关系(P0.05);Ki-67蛋白表达与患者的性别、年龄及肿瘤的生长部位、临床分期、肠壁浸润深度、淋巴结转移均无明确相关关系（P0.05）。我们按Ki-67蛋白表达强度将肿瘤归为高表达组（21例）与低表达组（29例）。 hMLH1蛋白表达阳性率在结直肠癌组为46.0%，显著高于正常大肠粘膜10%(P0.05）。 ERCC1蛋白表达阳性率在结直肠癌组织为54.00%，显著高于正常大肠粘膜10%(P0.05）。 在结直肠癌中ERCC1蛋白表达与hMLH1蛋白表达显著正相关(P0.05，r=0.227)。 结论：1.部分结直肠癌癌细胞hMLH1、ERCC1表达增高，这种增高受细胞增殖影响;***1、ERCC1表达与结直肠癌的发生、发展相关;***1、ERCC1表达率与肿瘤分化程度、患者临床分期有关，可能成为结直肠癌的标志物。 4.结直肠癌肿瘤hMLH1与ERCC1的表达常同时发生，联合检测二者表达可能有益于判断患者预后和制定化疗方案。