二烯丙基二硫下调cofilin1诱导人白血病HL-60细胞分化

作     者：贾艳红 

作者单位：南华大学 

学位级别：硕士

导师姓名：苏琦

授予年度：2012年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主      题：二烯丙基二硫 cofilin1 人白血病HL-60细胞 miRNA干扰 分化 

摘      要：目的：研究二烯丙基二硫（diallyl disulfide, DADS）下调cofilin1抑制人白血病HL-60细胞增殖、迁移与侵袭以及诱导分化的分子机制。 方法：运用RT-PCR、Western blot、免疫细胞化学技术观察DADS对HL-60细胞cofilin1表达的影响以及Rac1-Rock1-LIMK1信号通路的改变。采用RNA干扰技术，将干扰cofilin1的miRNA质粒pcDNA6.2-GW/EmGFPmiR-cofilin1瞬时转染人白血病HL-60细胞，RT-PCR、Western blot技术检测干扰效果并观察沉默cofilin1后HL-60细胞的cofilin1表达变化。MTT比色法、NBT还原实验、Transwell实验观察DADS和沉默cofilin1对HL-60细胞增殖、还原能力及侵袭能力的影响。 结果： ***对人白血病HL-60细胞cofilin1表达的影响 RT-PCR、Western blot显示，1.25mg·L-1DADS分别处理人白血病HL-60细胞0、12、24、48h后，与未处理组比较，cofilin1在mRNA水平、蛋白水平表达呈时间依赖性下降（P0.05）。表明沉默cofilin1基因可增强DADS对HL-60细胞侵袭能力的抑制作用。 5. DADS对Rac1-Rock1-LIMK1-Cofilin1信号通路的影响 RT-PCR、Western blot显示，DADS分别处理人白血病HL-60细胞12、24、48h后,与未处理组比较，Rac1、Rock1、LIMK1及p-cofilin1在mRNA、蛋白水平表达呈时间依赖性下降（P0.05）。 结论： 1. DADS可下调cofilin1诱导HL-60细胞分化。 2.沉默cofilin1可增强DADS诱导HL-60细胞分化能力。 3. DADS通过抑制Rac1-Rock-LIMK1通路下调与灭活cofilin1诱导HL-60细胞分化。