金莲花质量评价及茎叶开发利用研究

作     者：严力群 

作者单位：中国协和医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：丁万隆;陈震;李勇

授予年度：2008年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：金莲花 总黄酮 质量评价 茎叶 

摘      要：金莲花(Throllius chinensis Bge.)为毛茛科多年生草本植物,野生资源丰富,具有清热解毒之功效,民间用以治疗扁桃体炎、口疮喉肿、急性肠炎等。近年来,在民间用药基础上,结合现代药理研究,金莲花作为一较好的抗菌药物,其临床应用己被肯定,但目前国内外对于质量评价的系统研究较少。 本课题对金莲花的质量进行评价,以有效成分含量为指标,分别运用紫外分光光度法和HPLC法对不同品种、不同花期、不同采收部位进行了含量测定,实验证明,本研究方法简洁、可行、科学,为寻找金莲花新药源、制定合理的质量标准提供了科学的研究思路与方法。 本课题研究的主要结果如下: 1.选用L(3)正交表考察不同溶媒(B)、提取时间(C)、粉碎程度(A)、提取次数(D)对金莲花总黄酮含量的影响。结果表明,溶媒的改变对金莲花总黄酮含量的影响最大,其次为提取时间、粉碎程度,提取次数可看成是误差影响,综合考虑确定提取金莲花总黄酮的最佳方法为ABCD。 2.探索提取金莲花茎叶中总黄酮的最佳方法,利用分光光度法测定含量,分别考察了直接回流法、索氏提取法和超声提取法。通过含量测定结果得知,超声法提取所得总黄酮含量为5.824%,远远大于直接回流法2.658%和索氏提取法3.234%,且操作过程最易掌握,结果可靠,故确定超声法作为后续试验中提取金莲花茎叶的方法。 3.对金莲花不同生长期的茎叶部位中总黄酮含量的变化规律进行考察。结果显示,北京和坝上地区金莲花茎叶总黄酮含量的动态积累趋势随生长时间的不同均呈现相似的变化规律,均为由低到高再到低的趋势;坝上地区的金莲花不同生长期的茎叶中总黄酮含量均略高于北京,于6月中旬达到最高值6.511%,北京地区则出现在6月下旬(6.339%和5.824%):两个地区茎叶产量大、含量较高,可提供足够的黄酮类有效成分,为茎叶可作为新药用部位提供了理论基础。 4.对坝上不同区域的金莲花的总黄酮含量进行测定,结果在5.139%～8.431%,平均值6.936%,质量稳定;以御道口牧场金莲花总黄酮含量最高,三道河口最低;人工栽培金莲花的总黄酮含量为8.001%,高于坝上地区8个野生品金莲花的总黄酮含量平均值(6.803%);机械林场金莲花不同年份的总黄酮含量测定结果再次证明该区域金莲花总黄酮含量的稳定性好。 5.分析北京地区两种人工栽培金莲花在不同花期的总黄酮含量。结果显示,花蕾的总黄酮含量(10.00%和8.287%)明显高于初开放花(6.856%和6.009%)和全开放花(7.404%和6.204%),为合理采收金莲花及其质量评价提供理论依据;金莲花比短瓣金莲花含量高,提示品种影响药材质量。 6.对盛花期不同种源金莲花样品进行总黄酮含量测定,结果差异较大,在3.709%～10.004%之间,平均值6.857%;以北京地区人工栽培金莲花总黄酮含量最高,大兴安岭短瓣金莲花总黄酮的含量最低,金莲花和短瓣金莲花两个品种的含量普遍较高,再次提示品种是影响药材质量的重要因素;栽培品比原产地野生品的含量高,证明北京及坝上地区均适宜人工种植金莲花,为开展规范化、规模化的GAP种植提供科学依据。 7.利用HPLC法,测定坝上地区金莲花的牡荆苷含量,平均值为0.425%,御道口牧场含量最高0.578%,三道河口最低0.297%,在坝上不同的小区域内金莲花牡荆苷含量存在一定的差异,提示产地的生态环境与药材质量有关系;不同种源金莲花中牡荆苷含量0.201%～0.655%,平均值0.393%,以北京人工栽培金莲花含量最高0.655%,大兴安岭短瓣金莲花含量最低0.201%;北京和坝上地区栽培品种的牡荆苷含量均比野生品牡荆苷含量高,再次印证北京、坝上地区均适宜人工种植金莲花。