抑癌基因Fas在食管鳞癌组织中的甲基化状态分析

作     者：朱学雨 

作者单位：苏州大学 

学位级别：硕士

导师姓名：郑世营

授予年度：2016年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主      题：食管鳞癌 Fas基因 甲基化 临床意义 

摘      要：目的:观察食管鳞癌组织、癌旁组织、食管正常组织以及术前、术后血浆中Fas基因甲基化状态及Fas基因表达情况,探讨其在食管鳞癌发生、发展中的作用及其临床意义。方法:来自苏大附一院2014年1月至2015年1月间食管鳞癌组织标本72例,每例均取癌组织、癌旁组织(距肿瘤边缘0.5cm)及食管正常组织(距肿瘤边缘5cm以上的正常食管粘膜)。72例患者中,男性54例,女性18例。年龄432岁,中位年龄62岁。据UICC食管癌TNM分期标准(2009),72例患者中Ⅰ期11例,Ⅱ期31例,Ⅲ期26例,Ⅳ期4例;高分化30例,中分化26例,低分化16例;食管上段癌13例,食管中段癌35例,食管下段癌24例。标本在手术切除后半小时内于液氮中保存转至-80℃冰箱中,所有患者术前均未接受放化疗。66例食管癌患者于术前、术后分别留取血液2ml,离心后将血浆保存于-80℃冰箱中。采用RT-PCR法、免疫组化S-P法染色技术检测以上组织中Fas基因的表达情况,并采用甲基化特异性PCR(Methylation-specific PCR,MSP)法检测组织及血浆中Fas基因甲基化状态,并结合临床及病理资料对实验结果进行统计学分析。结果:1、食管癌组织、癌旁组织及食管正常组织中Fas基因表达情况72例食管癌组织、癌旁组织、食管正常组织中Fas基因表达率分别为23.6%(17/72)、70.8%(51/72)、90.3%(65/72),癌组织中Fas基因表达率显著低于癌旁组织及食管正常组织(χ2=71.537,P0.05)。3、食管癌组织中Fas基因表达情况与Fas甲基化状态的关系72例食管癌组织中Fas基因表达率为23.6%(17/72),癌组织中Fas基因表达率明显低于癌旁组织及食管正常组织。其中48例甲基化阳性标本中仅有4例(8.33%)检测到Fas的表达;而24例Fas基因甲基化阴性的标本中有13例(54.17%)检测到其表达。Fas基因甲基化阳性的食管癌组织中Fas基因表达率明显低于其甲基化阴性的食管癌组织,两者成明显负相关(χ2=18.635,P0.05)。4、食管癌术前、术后血浆中Fas基因甲基化状态66例食管癌患者术前、术后血浆中Fas甲基化率分别为45.5%(30/66)、16.7%(11/66),术前血浆中Fas甲基化阳性的30例患者中有19例在接受食管癌根治术后转为阴性,术后血浆中Fas甲基化率明显低于术前(χ2=12.772,P0.05)。食管癌组织中Fas甲基化阴性的患者术前、术后血浆中均未检测到Fas基因甲基化。结论:1、食管癌组织中抑癌基因Fas甲基化可能是导致Fas表达下降的重要机制之一。2、血浆中Fas基因的甲基化状态与肿瘤组织的甲基化状态密切相关。3、Fas基因有可能成为食管癌早期诊断、临床治疗效果监测的重要指标及其基因治疗的重要靶点。