中电导钙激活钾离子通道抑制剂对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖的影响

作     者：张磐石 

作者单位：华中科技大学 

学位级别：硕士

导师姓名：易继林

授予年度：2013年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主      题：IK1 三阴性乳腺癌 细胞增殖 细胞凋亡 克霉唑 TRAM-34 

摘      要：[目的]研究中电导钙激活钾离子通道(IK1)抑制剂(Blocker/Inhibitor)对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖的影响。 [方法]常规体外培养乳腺癌细胞MDA-MB-231细胞系;采用WesternBlotting(蛋白印迹)技术及免疫荧光技术检测IK1在MDA-MB-231细胞中的表达情况;采用膜片钳技术检测TRAM-34对MDA-MB-231细胞IK1的电生理学影响;采用克隆形成实验，MTT法，检测IK1特异性阻滞剂克霉唑(Clotrimazole)及TRAM-34对体外培养的MDA-MB-231细胞增殖的影响;采用流式细胞技术检测TRAM-34对体外培养的MDA-MB-231细胞凋亡的影响。所得到的数据使用SPSS19.0等软件进行统计学分析。 [结果]中电导钙激活钾离子通道IK1蛋白在乳腺癌细胞MDA-MB-231中表达，主要分部在细胞膜上。TRAM-34(10μM)可明显阻滞MDA-MB-231细胞钾离子外流。克霉唑(10-40μM)对MDA-MB-231细胞增殖最高抑制率50±7.0%(P0.05)，TRAM-34对MDA-MB-231细胞增殖最高抑制率20±4.0%(P0.05)，两者均随抑制剂浓度升高，对细胞抑制率增加;和对照组相比，干预组(TRAM-34)正常细胞比例明显下降，早期凋亡细胞比例明显上升，而中晚期凋亡及坏死细胞比例变化不明显，且随干预时间增加(24h2h)及药物浓度增加(10μM0μM)，细胞凋亡率增加(P0.05)。 [结论]MDA-MB-231细胞可作为研究表达IK1的乳腺癌细胞模型。TRAM-34可阻断MDA-MB-231细胞的IK1通道。IK1阻滞剂克霉唑和TRAM-34可明显抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖，且有浓度依赖性;TRAM-34可能通过促进细胞早期凋亡抑制细胞增殖，有时间及浓度依赖性。