苦杏仁甙免疫活性和抗肾脏纤维化作用的实验研究

作     者：盛明雄 

作者单位：福建医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：谭建明;郭君其

授予年度：2007年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：苦杏仁甙 淋巴细胞增殖 免疫增强 肾脏间质纤维化 纤维细胞增殖 单侧输尿管梗阻 

摘      要：目的:1、探讨苦杏仁甙对体外人淋巴细胞增殖的影响。2、研究苦杏仁甙对体外人淋巴细胞分泌细胞因子IL-2、γ-IFN和TGF-β1的影响。方法:1、用MTT比色法检测不同浓度苦杏仁甙对PHA诱导的体外人淋巴细胞增殖的影响。2、ELISA法检测淋巴细胞培养上清中的细胞因子IL-2、γ-IFN和TGF-β1浓度。结果:1、苦杏仁甙在25～800μg·mL-1范围内显著促进PHA诱导的人外周血T淋巴细胞增殖,浓度为200μg·mL-1时促进增殖作用最强,SI值高达1.67。2、苦杏仁甙可促进PHA刺激的外周血淋巴细胞分泌IL-2和γ-IFN,而抑制其分泌TGF-β1,并呈剂量依赖性。结论:苦杏仁甙能显著促进PHA诱导的人外周血T淋巴细胞增殖;并可促进经PHA刺激的外周血淋巴细胞分泌IL-2和γ-IFN,而抑制其分泌TGF-β1,从而发挥免疫增强作用。 第二部分:苦杏仁甙抑制肾脏间质纤维化的实验研究 实验一:苦杏仁甙抑制成人肾脏纤维细胞增殖的实验研究 目的:探讨苦杏仁甙对成人肾脏纤维细胞增殖实验的影响。方法:用消化法原代培养人肾成纤维细胞并用免疫细胞化学方法鉴定,继而采用MTT比色法检测苦杏仁甙对人肾成纤维细胞增殖的影响。结果:培养24h时,对照组与不同浓度苦杏仁甙组的成纤维细胞增殖无统计学差异。培养48h或72h时,不同浓度苦杏仁甙对成纤维细胞的增殖活性均有抑制作用,且呈一定剂量依赖性,在苦杏仁甙浓度100μg·mL-1时抑制作用最强,抑制率分别达31.53%和17.41%。结论:苦杏仁甙能明显抑制人肾成纤维细胞增殖并呈剂量依赖性。 实验二:苦杏仁甙抑制大鼠肾间质纤维化的实验研究 目的:观察苦杏仁甙治疗单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化作用并探讨其机理。 方法:用单侧输尿管梗阻的方法建立大鼠肾脏间质纤维化模型。60只Wistar大鼠随机分为假手术组、单侧输尿管梗阻组、苦杏仁甙3mg腹腔注射组和苦杏仁甙5mg腹腔注射组,分别于术后7d、14d、21d处死动物,观察各组大鼠肾脏病理损害程度。结果:除假手术组外其余各组随着时间的延长,肾间质纤维化的程度越来越严重。苦杏仁甙治疗组在7天和14天时与单侧输尿管梗阻组差别无统计意义,在21天时大鼠肾脏纤维化程度明显低于单侧输尿管梗阻组。结论:苦杏仁甙具有明显抑制大鼠肾间质纤维化作用。