吲哚胺2，3-双加氧酶（IDO）在子宫内膜异位症的表达以及功能研究

作     者：苏妍 

作者单位：复旦大学 

学位级别：硕士

导师姓名：朱晓勇

授予年度：2010年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100211[医学-妇产科学] 10[医学] 

主      题：子宫内膜异位症 IDO COX-2 MMP RT-PCR 

摘      要：目的：通过体外实验,观察子宫内膜异位症患者的在位内膜和异位内膜中IDO mRNA表达水平及其与COX-2、MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2 mRNA表达水平的相关性,初步探讨IDO在子宫内膜异位症形成机制中的调节功能。 材料与方法：收集子宫内膜异位症患者(主要是卵巢内膜样囊肿患者)的异位病灶42例及在位分泌期内膜28例;收集确诊未患有EMT而因其他原因手术或刮宫的患者子宫分泌期内膜22例作为对照组;用RT-PCR方法测定IDO、COX-2、MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2在正常内膜、在位内膜和异位病灶中的mRNA表达,运用ImageJ凝胶电泳分析软件检测上述因子mRNA表达水平。 结果： *** mRNA在人正常子宫内膜、EMT在位内膜和异位病灶中均有表达;对照组IDO mRNA表达水平显著低于EMT在位内膜及异位内膜(P0.05),且EMT在位内膜IDO mRNA表达水平显著低于异位内膜(P0.05)。且IDOmRNA在重型EMT内膜(n=37)中的表达显著高于轻型EMT内膜(n=43)(P0.05)。 2.曾用孕三烯酮治疗的EMT患者组异位内膜IDO mRNA表达水平显著低于未治疗EMT患者组异位内膜(P0.05)。 ***-2 mRNA在对照组内膜、EMT在位内膜、异位内膜中表达水平依次升高,两两比较均有显著性差异(P0.05)。 4.在位内膜IDO mRNA表达水平与在位内膜COX-2及MMP-2 mRNA表达水平呈正线性相关;异位内膜IDO表达水平与异位内膜COX-2及MMP-2 mRNA表达水平亦呈正线性相关。在位内膜及异位内膜中IDO mRNA表达水平与MMP-9 mRNA均无明显线性相关。 5.对照组内膜MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2 mRNA表达水平均显著低于EMT患者在位内膜及异位内膜(P0.05)。在位内膜与异位内膜中MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2 mRNA表达水平无显著性差异。异位内膜中MMP-2/TIMP-2比值显著高于在位内膜(P0.05)。 结论： ***在位及异位内膜中,MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2 mRNA表达水平高于对照组。其中异位内膜MMP-2/TIMP-2比值高于在位内膜,提示异位内膜中MMP-2活性增强,可能导致异位内膜侵蚀性增强。该结果与文献相关研究报道相一致。 *** mRNA在EMT在位及异位内膜中表达水平均显著高于对照组,并且与EMT在位及异位内膜中COX-2及MMP-2 mRNA表达水平均呈正线性相关,但与MMP-9无明显线性相关;此外,IDO mRNA在EMT异位内膜上表达水平显著高于在位内膜,且IDO mRNA在重型EMT内膜中的表达显著高于轻型EMT内膜,提示异位内膜组织中的TDO转录增强可能通过诱导COX-2活性促进PGE2合成分泌,由此诱导MMP-2活性增强,从而参与EMT病灶形成中内膜粘附及侵蚀等生物学过程,亦有可能参与EMT病情进展。 3.曾使用孕三烯酮治疗的EMT患者异位内膜TDO基因mRNA表达显著低于未治疗EMT患者异位内膜,提示孕三烯酮用于治疗EMT的机制可能与下调IDO表达,从而降低异位内膜侵蚀性有关。这为解析孕三烯酮的药理机制以及以IDO作为分子靶点的新药开发与研究奠定了初步的理论基础与实验依据。