乳腺浸润性导管癌中Caspase-3、OPN和Ezrin的表达及临床意义

作     者：王兴苗 

作者单位：郑州大学 

学位级别：硕士

导师姓名：李孟圈

授予年度：2011年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主      题：乳腺浸润性导管癌 天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3 骨桥蛋白 埃兹蛋白 

摘      要：乳腺癌是严重影响妇女身心健康甚至危及生命的最常见的恶性肿瘤之一,发病率占全球女性恶性肿瘤的第一位,且有进一步增高的趋势,近年来在我国也逐渐成为高发疾病。重要器官的转移是乳腺癌主要致死原因,针对乳腺癌的发生和进展机制的研究仍是当前研究的热点。浸润性导管癌（Invasive Ductal Carcinoma, IDC）是其最常见的类型,故而研究浸润性导管癌中特殊蛋白的表达及其之间的相关性对研究乳腺癌的发生进展机制具有重要代表性和临床意义。天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3（cysteinyl aspartate specific protease-3, Caspase-3）是近年来关注较多的Caspase家族中最重要的凋亡执行者之一,大多数触发细胞凋亡的因素最终均需通过Caspase-3介导的信号传导途径导致细胞凋亡。骨桥蛋白（osteopontin, OPN）是最近发现的一种带负电荷具亲水性的酸性分泌型钙结合磷酸化糖蛋白,具有细胞黏附、迁移、钙代谢、血管重塑、免疫调节等生物学功能,其表达在多种恶性肿瘤细胞中均有上调,且OPN的高表达的恶性肿瘤更易表现出侵袭转移的倾向。埃兹蛋白（Ezrin）是埃兹蛋白/根蛋白/膜突蛋白（ezrin/radixin/moesin, ERM）蛋白家族成员之一,能参与细胞内外信号传导,在细胞增殖、骨架重组、黏附、侵袭等重要活动中可能发挥重要作用。Caspase-3、OPN、Ezrin与肿瘤的发生、发展均有一定的相关性。本研究采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接（streptavidin-perosidase, SP）法检测三种蛋白在乳腺浸润性导管癌中的表达,旨在探讨三者在乳腺IDC的发生和发展中的作用,以期为乳腺癌早期诊断和诱导凋亡治疗提供理论依据。 目的 探讨Caspase-3、OPN和Ezrin在乳腺浸润性导管癌中的表达及其与临床病理因素的关系。 材料和方法 材料：随机选取郑州大学第一附属医院乳腺外科2003年1月至2004年12月间手术切除的乳腺癌浸润性导管癌标本71例（位于癌组织中央且避免中心坏死的组织）。另外从中随机选择33例距癌灶约5cm、且经病理证实的正常乳腺组织作为对照组。所有患者均为女性,记录临床资料,患者术前均未接受放、化疗及内分泌治疗。临床分期按国际抗癌联盟（UICC）规定的TNM分期标准,Ⅰ期22例,Ⅱ期31例,Ⅲ期18例;腋窝出现淋巴结转移50例,无淋巴结转移21例;组织学分级按世界卫生组织（WHO）标准,G1 15例,G2 24例,G3 32例;其中有50例（按TNM分期Ⅰ期15例,Ⅰ期24例,Ⅲ期11例）有5年及以上完整随访资料,其余失访,这50例患者中发生转移复发者27例,无转移复发者23例。所有患者均根据术中快速冰冻施行了乳腺癌根治或改良根治术,术后常规病理证实为浸润性导管癌。所取组织浸泡于中性福尔马林液中固定备用。 方法：应用免疫组织化学S-P法检测乳腺浸润性导管癌组织和配对正常乳腺组织中Caspase-3、OPN和Ezrin的表达情况。分析Caspase-3、OPN和Ezrin三者的表达同乳腺浸润性导管癌各项临床病理因素之间的关系,同时分析Caspase-3、OPN和Ezrin之间的相关性。运用SPSS18.0统计软件,组间差异、三指标与乳腺浸润性导管癌各病理参数间的关系用χ2检验进行分析;Caspase-3, OPN, Ezrin三指标间是否有相关性及相关性大小采用χ2检验及Pearson列联系数进行分析,检验水准a=0.05。 结果 Caspase-3在乳腺IDC组织中的阳性表达率（43.66%）与正常乳腺组织（75.76%）相比明显下调（P0.05）。Caspase-3的阳性表达率与乳腺IDC的淋巴结转移、肿瘤复发密切相关（P0.05）,而与患者年龄以及是否绝经没有明显相关性,在发生淋巴结转移及肿瘤复发的患者中Caspase-3的阳性表达几率降低,且乳腺癌的组织学分级越高,Caspase-3表达下调越明显。 OPN在乳腺IDC组织中的阳性表达率（74.65%）明显高于对照组（33.33%）,差异有统计学意义（P0.05）。进一步分析IDC组OPN表达与临床病理学参数的关系发现,乳腺IDC组中OPN的表达与淋巴结转移及肿瘤复发密切相关（P0.05）,且OPN的表达与患者年龄、是否绝经、病理学TNM分期及组织学分级无明显相关性（P0.05）。 Ezrin在乳腺IDC组织中的阳性表达率（64.79%）高于其在正常乳腺组织对照组中的表达（39.39%）,且差异有统计学意义（P0.05）。同时对临床病理特征资料的统计分析得出,随着临床TNM分期、淋巴结转移及组织学分级的增加Ezrin的表达有明显的增加（P0.05）,在发生复发的病例中Ezrin表达也有明显的增加。 乳腺浸润性导管癌中Caspase-3与OPN、Ezrin的表达呈负相关（r=-0.258、-0.313,P=0.023、0.004）,OPN与Ezrin的表达呈正相关（r=0.29、P=0.008）。 结论 Caspase-3在乳腺浸润性导管癌组织中低表达,而OPN和Ezrin则在乳腺IDC组织中高表达,提示三者可能参与了乳腺IDC的发生、发展过程;Caspase-3表达与OPN、Ezrin呈负相关,OPN表达与Ezrin呈正相关,提示在乳腺IDC发生发展过程中,它们之间可能存在既独立又协同的作用。