地锦草抗皮肤癣菌物质基础研究

作     者：李鹤 

作者单位：北京协和医学院 

学位级别：硕士

导师姓名：潘瑞乐

授予年度：2017年

学科分类：1006[医学-中西医结合] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

主      题：地锦草 抗皮肤癣菌 灰色关联度分析 液质联用 酚酸 黄酮 

摘      要：地锦草为大戟科（Euphorbiacea）植物地锦EuphorbiahumiusaWilld.和斑地锦Euphorbia macuLaata L.的干燥全草,广泛应用于中、蒙、维医药中。地锦草临床可用于治疗各种皮肤癣病,药理实验证明地锦草提取物具有抗皮癣菌的作用,但是对于其抗真菌的物质基础并未有深入研究。本文结合活性筛选、化学成分分离与鉴定、UPLC-PDA-QTOF-MSn 等技术研究地锦草Euphorbiahumiusa Willd..抗皮肤癣菌的物质基础并探讨活性成分。首先,将地锦草药材乙醇提取物分成不同部位,进行抗真菌活性筛选和UPLC图谱分析,根据相似度评价及活性筛选结果确定地锦草抗皮肤癣菌活性部位。采用正相硅胶、MCI GEL树脂、聚酰胺色谱、ODS反相填料、Sephadex LH-20和制备液相等多种色谱方法从地锦草活性部位分离得到22个单体,并通过理化性质和UV、NMR、MS等波谱数据鉴定了 20个化合物结构。其中黄酮醇类13个:山柰酚（1）、槲皮素（2）、山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（3）、槲皮素-3-O-α-L-呋喃阿拉伯糖苷（4）、槲皮素-3-0-（6-O-没食子酰基）-吡喃葡萄糖苷（5）、山柰酚-3-O-α-D-吡喃阿拉伯糖苷（6）、山柰酚-3-O-β-D-吡喃木糖苷（7）、山柰酚-3-O-α-L-呋喃阿拉伯糖苷（8）、山柰酚-3-0-（6-O-没食子酰基）-β-D-半乳糖苷（12）、槲皮素-3-O-{鼠李糖（1→6）-[木糖（1→2）]-半乳糖苷}（14）、芦丁（15）、异槲皮素（16）、槲皮素-3-O-β-D-木糖（1→2）-β-D-葡萄糖苷（18）;酚酸类5个:没食子酸乙酯（9）、反式阿魏酸（10）、原儿茶酸乙酯（11）、3,3’-二甲基鞣花酸-4-O-β-D-葡萄糖苷（13）、没食子酸甲酯（17）;三萜及甾醇类化合物2个:cycloart-23-ene-3β,25-diol（19）、β-谷甾醇（20）。其中,化合物 5、7、10、11、12、14、18为首次从该植物中分离得到。在此基础上,应用UPLC-PDA-QTOF-MSn技术对醇提物和活性部位的主要成分进行快速表征,共鉴定出59种成分,其中包括44种酚酸类成分,15种黄酮类成分。最后,利用灰关联度分析对地锦草抗皮肤癣菌活性成分进行了初步探讨,结果表明29个化合物与地锦草抗皮肤真菌活性的相关度在0.6以上,其中鞣花酸、山柰酚、槲皮素与活性关联度较高。此外,本文还对地锦草化学成分和药理活性进行了综述。