宿主细胞蛋白HSPA2与TGEV Nsp2的相互作用及其对病毒复制的影响

作     者：王亚楠 韩露露 孙傲颖 姜艳平 崔文 乔薪瑗 唐丽杰 徐义刚 李一经 王丽 WANG Yanan;HAN Lulu;SUN Aoying;JIANG Yanping;CUI Wen;QIAO Xinyuan;TANG Lijie;XU Yigang;LI Yijing;WANG Li

作者机构：东北农业大学动物医学学院哈尔滨150030 东北农业大学动物科学学院哈尔滨150030 黑龙江省动物疾病防控技术与制剂创制实验室哈尔滨150030 

出 版 物：《黑龙江畜牧兽医》 (Heilongjiang Animal Science And veterinary Medicine)

年 卷 期：2020年第21期

页      面：1-6,14,175页

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：国家自然科学基金项目(31702260) 

主　　题：猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV) 热休克蛋白70-2(HSPA2) 蛋白互作 病毒复制 免疫共沉淀(Co-IP) 真核表达 

摘      要：为了探究猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)非结构蛋白2(Nsp2)与宿主细胞热休克蛋白70-2(HSPA2)的相互作用,以及HSPA2表达对TGEV复制的影响,试验利用RT-PCR方法获得猪源HSPA2基因并构建其真核表达载体pCMV-Myc-HSPA2,通过Western-blot和间接免疫荧光试验检测真核表达载体pCMV-Myc-HSPA2在IPEC-J2细胞中的表达情况。利用免疫共沉淀(Co-IP)和共定位试验进一步验证TGEV Nsp2和宿主细胞蛋白HSPA2之间是否存在相互作用,利用基因过表达技术在IPEC-J2细胞中过表达HSPA2后接种TGEV,分别测定接种后36,48小时时病毒TCID50。结果表明:真核表达载体pCMV-Myc-HSPA2能够在IPEC-J2细胞中成功表达,HSPA2与Nsp2之间存在相互作用,并且HSPA2表达量升高后TGEV的TCID50略有升高。说明宿主细胞蛋白HSPA2与TGEV Nsp2之间存在相互作用,且HSPA2的表达对TGEV复制具有一定促进作用。