27nt-miRNA对氧化型低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡的影响
Effect of 27nt-miRNA on apoptosis of human umbilical vein endothelial cells induced by oxidized low-density lipoprotein作者机构:广西医科大学药学院广西南宁530021 广西中医药大学附属国际壮医医院科技部广西南宁530201 广西医科大学第一附属医院药学部广西南宁530021
出 版 物:《中国病理生理杂志》 (Chinese Journal of Pathophysiology)
年 卷 期:2020年第36卷第10期
页 面:1745-1753页
核心收录:
学科分类:1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100101[医学-人体解剖与组织胚胎学] 100104[医学-病理学与病理生理学] 10[医学]
基 金:国家自然科学基金项目资助(No.81373403) 广西创新驱动发展专项基金资助项目(桂科AA17202034) 广西自治区南宁市良庆区科学研究与技术开发计划课题(No.201911) 广西中医药大学博士科研启动基金(No.2018BS059) 广西高校中青年教师科研基础能力提升项目(No.2019KY0330)
主 题:27nt-miRNA 人脐静脉内皮细胞 氧化型低密度脂蛋白 细胞凋亡
摘 要:目的:探讨27nt-miRNA(27nt-miR)对氧化型低密度脂蛋白(Ox-LDL)诱导人脐静脉内皮细胞(HU⁃VECs)凋亡的影响及分子机制。方法:体外培养HUVECs,分为正常对照组、Ox-LDL组、27nt-miR+Ox-LDL组、anti-27nt-miR+Ox-LDL组和阴性对照+Ox-LDL组。正常对照组给予正常培养;Ox-LDL组用40 mg/L Ox-LDL作用48 h诱导细胞凋亡;27nt-miR+Ox-LDL组、anti-27nt-miR+Ox-LDL组及阴性对照+Ox-LDL组分别以相同的操作方法转染相应慢病毒质粒后用40 mg/L Ox-LDL作用48 h诱导细胞凋亡。采用CCK-8法检测细胞活力,划痕实验检测细胞的迁移能力,caspase-3活性试剂盒检测细胞内caspase-3活性,RT-qPCR法和Western blot法检测细胞内Bcl-2、Bax和caspase-3 mRNA及蛋白的表达情况。结果:与阴性对照+Ox-LDL组相比,27nt-miR+Ox-LDL组HUVECs的27ntmiR高表达可显著降低细胞活力和迁移能力(P0.05),显著增加Ox-LDL所致的caspase-3活性和细胞凋亡(P0.05),亦可显著上调Ox-LDL所致的Bax和caspase-3 mRNA和蛋白表达(P0.05),下调Bcl-2的mRNA和蛋白表达(P0.05);而anti-27nt-miR+Ox-LDL组,上述所测指标均表现出相反趋势。结论:27nt-miR可能通过调控Bax、cas⁃pase-3和Bcl-2凋亡/抗凋亡蛋白的表达促进Ox-LDL体外诱导的HUVECs凋亡进而抑制HUVECs活力和迁移。