特异性小分子RNA沉默转录因子E2F-1表达对小鼠精原干细胞凋亡的影响

作     者：曾汉青 朱朝辉 万锋 王进 李森 张友朋 Zeng Hanqing;Zhu Zhaohui;Wan Feng;Wang Jin;Li Sen;Zhang Youpeng

作者机构：华中科技大学同济医学院附属协和医院泌尿外科武汉430022 

出 版 物：《中华实验外科杂志》 (Chinese Journal of Experimental Surgery)

年 卷 期：2014年第31卷第7期

页      面：1533-1535页

核心收录：

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100101[医学-人体解剖与组织胚胎学] 10[医学] 

基　　金：湖北省自然科学基金资助项目(2013CFB092) 

主　　题：RNA干扰 精原干细胞 转录因子E2F1 脱噬作用 

摘      要：目的 观察小分子干扰RNA（siRNA）沉默转录因子E2F-1表达对小鼠精原干细胞（SSCs）凋亡的影响。方法 采用Percoll液密度梯度离心分离和流式细胞仪分选纯化SSCs进行体外培养,以脂质体法转染pSilencer4.1-E2F1至SSCs,并用实时定量逆转录聚合酶链反应（RT-qPCR）和Western blot检测E2F-1的表达水平,流式细胞仪检测siRNA干扰E2F-1表达后对SSCs凋亡的影响。结果 RT-qPCR结果实验组mRNA的2ΔΔCt值（0.32）明显低于未转染组（0.10）和阴性对照组（1.04）,Western blot显示实验组条带灰度低于未转染组和阴性对照组,流式细胞术检测显示实验组凋亡率（7.69%）低于未转染组（23.07%）和阴性对照组（24.19%）,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 siRNA靶向干扰转录因子E2F-1能显著降低小鼠SSCs的凋亡率。