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辣根过氧化物酶和荧光碳点的复合物研究

Research on the complex of horseradish peroxidase with fluorescent carbon dots

作     者:刘利 丁海贞 房伟 毕红 LIU Li;DING Hai-zhen;FANG Wei;BI Hong

作者机构:安徽大学化学化工学院合肥230601 安徽大学生命科学学院合肥230601 现代生物制造安徽省重点实验室合肥230601 

出 版 物:《生物学杂志》 (Journal of Biology)

年 卷 期:2020年第37卷第4期

页      面:75-78页

学科分类:0710[理学-生物学] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 07[理学] 

基  金:国家自然科学基金项目(51772001)。 

主  题:辣根过氧化物酶 碳点 荧光 免疫荧光分析 

摘      要:辣根过氧化物酶(HRP)是一种来源于辣根的含有铁离子的糖蛋白,可用于生化分析且在过氧化氢存在时能催化苯酚等物质氧化,HRP可与许多物质复合进而改善性能并拓宽其应用。采用一步水热法合成了平均尺寸约2 nm的氟掺杂的荧光碳点(F-CDs)。所得F-CDs在紫外灯下发黄绿色荧光且具有明显的激发光依赖性和浓度依赖性,以硫酸喹啉盐为参比计算出其相对量子产率高达45.6%。研究表明,F-CDs在Hela细胞内具有较好显影性能,F-CDs可与HRP形成稳定的复合物(F-CDs/HRP),该复合物不仅保留酶氧化2,2′-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS)的能力,还保留着F-CDs优异的荧光性能。此外,加入过氧化氢的浓度影响F-CDs/HRP催化氧化ABTS的能力。在低温如4℃时,F-CDs/HRP复合物仍然可以迅速催化氧化ABTS,能通过溶液显色程度来定性分析F-CDs/HRP中HRP的催化活性。因此,F-CDs/HRP复合物有应用于免疫荧光分析的潜力。

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