常氏肝癌细胞cDNA文库的构建及ADAMs相关基因的免疫筛选与序列分析
Construction of Chang Liver cDNA Library and Immunoscreening of ADAMS Related Genes作者机构:新乡医学院细胞生物学教研室新乡453003 河南师范大学生命科学学院新乡453002
出 版 物:《遗传》 (Hereditas(Beijing))
年 卷 期:2004年第26卷第6期
页 面:793-796页
核心收录:
学科分类:1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学]
基 金:国家自然科学基金 (No .3 9970 3 62 ) 河南省重大科技攻关项目 (No .0 12 2 0 3 190 0 )资助~~
主 题:常氏肝癌细胞 cDNA文库 ADAMs抗体 免疫筛选 基因克隆 同源检索
摘 要:抽提常氏肝癌细胞的总RNA ,以oligo(dT)为引物 ,通过两次转换模板 ,采用LD PCR合成全长cDNA ,在cDNA两端引入SfiⅠ的酶切位点。以λTriplEX2为载体经过包装后构建了常氏肝癌细胞cDNA表达文库。以ADAMs通用抗体 ,用免疫筛选技术从常氏肝癌cDNA文库中筛选出 2 2个阳性克隆 ,经测序分析和BLAST检索 ,证实其中一个为新基因 ,部分区域具有蛋白酶的功能 ,对该基因进行了GenBank登录 ,获注册号为AY0 780 70。