新型免疫佐剂在淋巴细胞杂交瘤技术中的应用
Application of a new adjuvant (CpG ODN)in the preparation of lymphocyte hybridoma technique作者机构:第四军医大学免疫学教研室陕西西安710032
出 版 物:《免疫学杂志》 (Immunological Journal)
年 卷 期:2003年第19卷第6期
页 面:419-423页
核心收录:
学科分类:1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学]
基 金:教育部"高等学校骨干教师资助计划"项目 (2 0 0 0年度 )
主 题:免疫佐剂 淋巴细胞杂交瘤 免疫调节作用 ImmunEasy^TM 单克隆抗体
摘 要:目的 观察新型免疫佐剂ImmunEasyTM(CpGODN)的免疫调节作用 ,并与弗氏佐剂相比较 ,探讨其在单克隆抗体制备中的应用前景。方法 将小鼠用新型免疫佐剂ImmunEasyTM 或弗氏佐剂混合原核表达的重组APRIL抗原 ,分别以常规免疫和少量抗原免疫方案免疫Balb c小鼠 ,用间接ELISA法检测不同时相小鼠免疫血清抗APRIL抗体的总效价及各类和亚类的效价。建立一种能在单个细胞水平反映小鼠B细胞分泌特异性抗体亚类的改良ELISPOT方法 ,并对两种佐剂免疫组中配对的小鼠进行检测。常规方法制备杂交瘤 ,以间接ELISA法筛选阳性杂交瘤 ,比较不同佐剂免疫小鼠所获得的杂交瘤上清液的类及其亚类频率。结果 与弗氏佐剂相比 ,ImmunEasyTM 在单克隆抗体制备过程中可明显减少抗原用量 ,缩短免疫周期 ,提高免疫血清效价 ,并增加IgG2a、IgM及IgA抗体的比例。结论 在细胞融合制备鼠源性mAb中 ,应用ImmunEasyTM,可减少免疫原用量 ,提高效率 ,还可优先获得某些类及其亚类的mAb。