豆制何首乌中异黄酮成分的检测及对BMSCs增殖的影响

作     者：郭千祥 史旭华 梁幼玲 刘铭超 宋嬿 白俊其 黄志海 丘小惠 GUO Qianxiang;SHI Xunhua;LIANG Youling;LIU mingchao;SONG Yan;BAI Junqi;HUANG Zhihai;QIU Xiaohui

作者机构：广州中医药大学第二临床医学院广东广州510120 上海上药华宇药业有限公司上海200002 广东省中医症候临床研究重点实验室广东广州510006 

出 版 物：《中华中医药学刊》 (Chinese Archives of Traditional Chinese Medicine)

年 卷 期：2020年第38卷第7期

页      面：157-162,I0011页

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81373967) 国家发展改革委、国家中医药管理局中药标准化项目(ZYBZH-Y-SH-38) 广东省科技计划(2017B030314166) 广东省中医药局科研项目(20184013) 广东省中医院中医药科学技术研究专项(中药精准煮散饮片标准化研究及应用启动项目) 

主　　题：豆制何首乌 Q-Exactive Plus LC-MS/MS 大豆苷元 染料木素 薄层色谱 BMSCs 

摘      要：目的采用Q Exactive Plus LC-MS/MS定性鉴定豆制何首乌中微量异黄酮类成分,建立豆制何首乌与清蒸何首乌的薄层色谱(TLC)鉴别方法,并考察大豆苷元、染料木素对骨髓间充质干细胞(BMSCs)的增殖作用。方法采用UPLC-Q-Exactive高性能四极杆母离子选择性与高分辨准确质量数(HR/AM)Orbitrap检测相结合的技术定性鉴定目标成分,选用色谱柱Phenomenex C18柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm Phenomenex公司,美国);流动相:乙腈(D)-0.1%甲酸水(A)梯度洗脱,质谱采用负离子监测模式、采用全扫描及二级质谱扫描的功能,对微量目标化学成分进行快速识别;使用硅胶GF254薄层板对豆制何首乌中黑豆异黄酮类成分进行定性鉴别;采用MTT法检测大豆苷元、染料木素对BMSCs的增殖作用。结果UPLC-Q-Exactive四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱技术,使用少量对照品快速分析鉴定出豆制何首乌中微量的目标成分,具有高效分离及高灵敏检测优势;TLC鉴别大豆苷元斑点特征明显,专属性强、重复性好,方法简便;染料木素对BMSCs具有抑制作用,大豆苷元具有促进BMSCs增殖的作用。结论豆制何首乌中可检测到异黄酮微量组分,其中大豆苷元为LC-MS与TLC较易检测成分,可作为TLC鉴别豆制何首乌与清蒸何首乌的特征成分,可能为豆制何首乌补血功效增强的药效物质基础之一,可作为其质量控制的指标成分。