蜂蜜中外源性γ-淀粉酶残留量的测定

作     者：费晓庆 吴斌 沈崇钰 张睿 丁涛 李丽花 FEI Xiaoqing;WU Bin;SHEN Chongyu;ZHANG Rui;DING Tao;LI Lihua

作者机构：江苏出入境检验检疫局食品实验室江苏南京210001 

出 版 物：《色谱》 (Chinese Journal of Chromatography)

年 卷 期：2012年第30卷第8期

页      面：777-781页

核心收录：

学科分类：081704[工学-应用化学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 070302[理学-分析化学] 0703[理学-化学] 

基　　金：国家质量监督检验检疫总局科技计划项目(2011IK212) 江苏出入境检验检疫局科研项目(2011KJ40) 

主　　题：液相色谱-同位素质谱联用法 凝胶柱色谱 酶反应 γ-淀粉酶 大米糖浆 掺假 蜂蜜 

摘      要：采用液相色谱-同位素质谱联用法(LC-IRMS)建立了测定蜂蜜中外源性γ-淀粉酶残留量的方法。先采用凝胶色谱柱对蜂蜜样品进行预分离,将样品中所含的酶与糖分离开。根据γ-淀粉酶可将底物麦芽糖酶解为葡萄糖的原理,在55℃、pH 4.5的0.03mol/L磷酸盐缓冲液中将γ-淀粉酶与麦芽糖反应48h后,采用LC分离麦芽糖和葡萄糖,以IRMS测定酶解产物葡萄糖的含量来确定γ-淀粉酶的残留量。本方法的线性范围为5～200U/kg,定量限为5U/kg,回收率为89.6%～108.2%,相对标准偏差为3.3%～4.9%。采用本方法对市售蜂蜜和大米糖浆共38个样本进行了考察,γ-淀粉酶的检出率为76.3%。为了进一步验证本方法的检测能力,测定了掺入15%(质量分数)大米糖浆的蜂蜜样品,测得γ-淀粉酶的含量为10.2U/kg。本方法能够有效地从酶学的角度鉴定蜂蜜中是否含有大米糖浆。