不同MDCK单克隆细胞株对H5亚型禽流感病毒增殖条件和放大工艺的研究

作     者：方琳 朱辉 黄皓源 彭思力 覃海康 梁昭平 FANG Lin;ZHU Hui;HUANG Hao-yuan;PENG Si-li;QIN Hai-kang;LIANG Zhao-ping

作者机构：广州市华南农大生物药品有限公司广东广州511300 

出 版 物：《动物医学进展》 (Progress In Veterinary Medicine)

年 卷 期：2020年第41卷第4期

页      面：38-41页

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：广州市民生科技攻关计划(201803020030) 

主　　题：H5亚型禽流感病毒 MDCK单克隆细胞株 无血清全悬浮培养 接毒量 收获时间 

摘      要：为了解H5亚型禽流感病毒rFJ56株在MDCK全悬浮细胞上的增殖规律,确定100 L生物反应器工艺的最适接毒量和收获时间,对H5亚型禽流感病毒rFJ56株敏感的MDCK全悬浮细胞进行单克隆筛选和全悬浮驯化,筛选出对该毒株最敏感的MDCK单克隆细胞株;在摇瓶工艺的基础上,将该细胞在100 L生物反应器中接种H5亚型禽流感病毒rFJ56株,检测接种后不同时间病毒HA效价和病毒滴度(EID 50),确定最适接毒量和收获时间。共筛选出22株MDCK全悬浮细胞单克隆细胞株,其中5株对H5亚型禽流感病毒rFJ56株最敏感,接种后病毒HA效价均可达到9 log2;对MDCK单克隆细胞株按0.01%体积比接种H5亚型禽流感病毒rFJ56株,在100 L生物反应器中培养60 h,HA效价可达10 log2,病毒含量可达108.17 EID 50/0.1 mL,可为H5亚型禽流感病毒无血清全悬浮培养放大工艺提供参考。