生鲜牛奶中牛分支杆菌PCR检测方法的建立

作     者：程亮 宁蓬勃 张彦明 曹伟伟 刘伟 战仁武 CHENG Liang;NING Pengbo;ZHANG Yanming;CAO Weiwei;LIU Wei;ZHAN Renwu

作者机构：西北农林科技大学动物医学院陕西杨凌712100 新乡市动物卫生监督所河南新乡453000 

出 版 物：《动物医学进展》 (Progress In Veterinary Medicine)

年 卷 期：2013年第34卷第11期

页      面：40-45页

学科分类：0710[理学-生物学] 090601[农学-基础兽医学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家公益性行业(农业)专项(200903055) 

主　　题：牛分支杆菌 聚合酶链反应 生鲜牛奶 

摘      要：为建立生鲜牛奶中牛分支杆菌的PCR检测方法,选择牛分支杆菌pncA的基因序列中一段大小为423bp的片段作为靶序列,设计并合成一对引物,对所建立的PCR方法进行了特异性、敏感性和重复性试验。结果表明,建立的PCR方法在牛分支杆菌污染模型乳中成功扩增出了423bp的特异性目的条带,而分别添加有沙门菌、大肠埃希菌、无乳链球菌、金黄色葡萄球菌、嗜肺巴氏杆菌、铜绿假单胞菌及枯草杆菌的乳样中均未扩增出任何条带。牛分支杆菌的DNA最低检测限为12.18pg/μL,牛分支杆菌污染牛奶模型的敏感性为3cfu/mL。建立的方法可用于牛奶中牛分支杆菌的检测。