金龟子绿僵菌发酵液中苦马豆素含量及催化酶基因mRNA表达分析
mRNA Expression Analysis of Catalytic Enzyme Gene and Content of Swainsonine in the Fermentation Broth of Metarhizium anisopliae作者机构:西北农林科技大学动物医学院杨凌712100
出 版 物:《畜牧兽医学报》 (ACTA VETERINARIA ET ZOOTECHNICA SINICA)
年 卷 期:2020年第51卷第4期
页 面:881-887页
核心收录:
学科分类:09[农学] 0903[农学-农业资源与环境]
基 金:陕西省自然科学基金重点项目(2017JZ004) 青海省科技援青专项(2020-QY-210)
摘 要:旨在探明金龟子绿僵菌发酵液中苦马豆素含量及与苦马豆素生物合成有关的催化酶基因mRNA表达的关系,将金龟子绿僵菌接种于察氏培养基进行发酵培养,运用Q Exactive高分辨质谱仪检测培养第1、3、5、7天发酵液中苦马豆素的含量,采用qRT-PCR法检测培养第1、3、5、7天发酵液中苦马豆素生物合成通路上的催化酶基因SwnA、SwnH1、SwnH2、SwnK、SwnN、SwnR和SwnT的mRNA转录水平。结果显示,根据苦马豆素质量浓度和峰面积的变化测算出回归方程为y=31302.5x-45910.5(R2=0.9967),在培养第3天发酵液中苦马豆素含量最高为174.014μg·mg^-1;SwnA、SwnH1、SwnH2、SwnK、SwnN、SwnR和SwnT基因在不同发酵时期mRNA表达差异较大,其中SwnR基因mRNA表达与发酵液中苦马豆素含量变化相一致,而SwnH2基因mRNA表达与发酵液中苦马豆素含量变化相反。结果表明,金龟子绿僵菌SwnR基因mRNA表达与苦马豆素合成关系密切,可为后续开展苦马豆素微生物发酵工艺及其生物合成通路研究提供重要参考。