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金龟子绿僵菌CQMa421和球孢白僵菌ZJU435对红火蚁毒力及聚硅氧烷的增效作用研究

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环境昆虫学报 2024年第2期46卷 377-388页

作者：吴慧敏白卫辉邓杰夫彭李亚林馥芬李珉珉陆永跃许益镌文引李平东王磊华南农业大学植物保护学院广州510642 深圳市农业科技促进中心深圳518057 重庆聚立信生物工程有限公司重庆401120

为探索红火蚁Solenopsis invicta的生物防治方法,本文系统评估了金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae CQMa421和球孢白僵菌Beauveria bassiana ZJU435对红火蚁的毒力以及聚硅氧烷对其的增效作用,并评估了两株虫生真菌对红火蚁的田间防... 详细信息

为探索红火蚁Solenopsis invicta的生物防治方法,本文系统评估了金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae CQMa421和球孢白僵菌Beauveria bassiana ZJU435对红火蚁的毒力以及聚硅氧烷对其的增效作用,并评估了两株虫生真菌对红火蚁的田间防治效果。结果显示,以处理第10天时的死亡率计算,金龟子绿僵菌CQMa421对红火蚁工蚁的致死中浓度LC_(50)为9.16×106孢子/mL;以8×10^(8)孢子/mL的死亡率计算,其对红火蚁工蚁的致死中时LT_(50)为3.534 d。以处理第10天时的死亡率计算,球孢白僵菌ZJU435对红火蚁工蚁的致死中浓度LC_(50)为1.5×10^(5)孢子/mL;以1×10^(9)孢子/mL的死亡率计算,其对红火蚁工蚁的致死中时LT_(50)为0.218 d。混入0.5μL/mL及以上浓度的聚硅氧烷可显著提高低浓度金龟子绿僵菌CQMa421及球孢白僵菌ZJU435对红火蚁毒力。田间试验结果显示,混入0.5μL/mL聚硅氧烷的3.2×10^(7)孢子/mL金龟子绿僵菌CQMa421和4×10^(7)孢子/mL球孢白僵菌ZJU435对红火蚁的综合防效分别为83.99%和90.44%,低于商品制剂0.1%茚虫威饵剂的综合防效93.89%。研究结果表明,金龟子绿僵菌CQMa421和球孢白僵菌ZJU435对红火蚁具有较高毒力,在红火蚁生物防治中具有较高开发潜力。

关键词：红火蚁金龟子绿僵菌球孢白僵菌表面活性剂灌巢

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金龟子绿僵菌深层培养产几丁质酶的研究

高校化学工程学报 2005年第3期19卷 362-367页

作者：杨革陈洪章李佐虎中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室北京100080

金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)是一种重要的昆虫寄生真菌,从自然罹病死亡的金龟子体内分离到一株金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)M-6.研究了该菌深层培养产几丁质酶的情况,几丁质酶合成的最佳碳源和诱导物为几丁质,在以0.... 详细信息

金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)是一种重要的昆虫寄生真菌,从自然罹病死亡的金龟子体内分离到一株金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)M-6.研究了该菌深层培养产几丁质酶的情况,几丁质酶合成的最佳碳源和诱导物为几丁质,在以0.5%(w/v)几丁质为碳源时,其产几丁质酶活达0.126IU·mL-1,在一定范围内增加培养基中几丁质浓度,葡萄糖浓度,微量元素盐浓度和碳氮比都能提高几丁质酶活.胆汁酸和吐温80作为表面活性剂能显著提高几丁质酶活.通过摇瓶试验得到优化培养基和培养条件.根据优化条件在摇瓶和3.7L发酵罐中分别进行产酶试验, 实验结果表明,几丁质酶活分别达到0.231 IU·mL-1和0.273 IU·mL-1.最适反应温度为55℃,最适反应pH6.0,在45℃,pH 3.0～ 9.5较为稳定.Zn2+、Ca2+、Ba2+和Mn2+离子对几丁质酶活性有明显的促进作用,而Hg2+、Co2+和Fe2+离子完全抑制几丁质酶的活性.

关键词：金龟子绿僵菌几丁质酶深层培养活性影响因子

金龟子绿僵菌羧基转运蛋白基因MaJEN1及其启动子的克隆与分析

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Acta Genetica Sinica 2003年第3期30卷 283-288页

作者：方卫国张永军肖月华马金成杨星勇裴炎西南农业大学生物技术中心重庆400716

用YADE法扩增了球孢白僵菌T DNA插入突变体T1 2 中与T DNA左边界相连的基因组序列。在此基础上得到了金龟子绿僵菌的羧基转运蛋白的全长cDNA ,MaJEN1。MaJEN1全长 16 95bp ,其中含有长为 15 2 4bp的开放阅读框 (ORF) ,编码 5 0 8个氨基... 详细信息

用YADE法扩增了球孢白僵菌T DNA插入突变体T1 2 中与T DNA左边界相连的基因组序列。在此基础上得到了金龟子绿僵菌的羧基转运蛋白的全长cDNA ,MaJEN1。MaJEN1全长 16 95bp ,其中含有长为 15 2 4bp的开放阅读框 (ORF) ,编码 5 0 8个氨基酸的蛋白。氨基酸序列与粗糙脉孢霉和啤酒酵母菌的羧基转运蛋白JEN1相似性分别为 6 9%和 31%。采用PCR扩增得到了MaJEN1的基因组序列GMaJEN1,序列分析发现 ,GMaJEN1含有两个内含子。Southern杂交发现GMaJEN1在金龟子绿僵菌基因组上为单拷贝。利用RT PCR法对MaJEN1的表达特性进行了分析 ,结果表明MaJEN1在蟑螂壳诱导培养基中表达 ,在该培养基中的表达受葡糖糖抑制。进一步采用YADE法得到了长为 16 2 6bp的GMaJEN1上游序列 ,其中含有可能的葡萄糖抑制调控序列。

关键词：金龟子绿僵菌羧基转运蛋白表达特性启动子 MaJEN1 克隆球孢白僵菌

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金龟子绿僵菌菌株生长环境变量的优化

生态学杂志 2008年第8期27卷 1322-1326页

作者：杨腊英甘露刘丽文明富黄俊生中国热带农业科学院环境与植物保护研究所海南省热带农业有害生物检测监控重点实验室海南儋州571737 华南热带农业大学农学院海南儋州571737

金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae ***)是一种广谱的昆虫病原真菌,提高菌株的生长速率及产孢量具有重要的意义。分别对2株金龟子绿僵菌菌株MA4与MAlm1的菌丝生长及次代产孢具有影响的培养温度、培养基初始pH、装液比、光照及微量元... 详细信息

金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae ***)是一种广谱的昆虫病原真菌,提高菌株的生长速率及产孢量具有重要的意义。分别对2株金龟子绿僵菌菌株MA4与MAlm1的菌丝生长及次代产孢具有影响的培养温度、培养基初始pH、装液比、光照及微量元素等环境因素进行了测定。经过优化得到2菌株最佳培养条件分别为:MA4菌株在28℃、pH7、装液比为75ml/250ml、加入微量元素Mn全光照培养时生长最好、次代产孢量最高;MAlm1菌株在28℃、pH9、装液比为75ml/250ml、加入微量元素Cu、黑暗培养时生长最好、次代产孢量最高。

关键词：金龟子绿僵菌环境因子菌丝生长量次代产孢量

金龟子绿僵菌对斜纹夜蛾幼虫的生防效果、抗氧化酶活性和肠道细菌群落的影响

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微生物学报 2021年第5期61卷 1171-1183页

作者：谭格李天铭周志成李江舟张立猛黄智华中南大学资源加工与生物工程学院湖南长沙410083 湖南省烟草科学研究所湖南长沙410004 云南省烟草公司玉溪市公司云南玉溪653100 烟草行业病虫害生物防治工程研究中心云南玉溪653100

【目的】测定金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)对斜纹夜蛾(Spodoptera litura)2龄幼虫的毒力,研究金龟子绿僵菌侵染后寄主体内抗氧化酶活性和肠道内细菌群落的变化,探讨斜纹夜蛾对金龟子绿僵菌侵染的防御机制。【方法】采用浸渍法... 详细信息

【目的】测定金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)对斜纹夜蛾(Spodoptera litura)2龄幼虫的毒力,研究金龟子绿僵菌侵染后寄主体内抗氧化酶活性和肠道内细菌群落的变化,探讨斜纹夜蛾对金龟子绿僵菌侵染的防御机制。【方法】采用浸渍法测定不同浓度金龟子绿僵菌对斜纹夜蛾2龄幼虫的毒力;应用Illumina MiSeq高通量测序技术测定肠道细菌群落。【结果】不同浓度的孢悬液对斜纹夜蛾2龄幼虫均有一定的毒力,处理7 d时半致死浓度(LC_(50))为3.944×10^(7)个孢子/mL;浓度为1.0×10^(9)个孢子/mL时,半致死时间最短(LT_(50))为4.6 d,校正后的死亡率为81.03%。处理后未致死的斜纹夜蛾幼虫体内抗氧化酶活性显著高于对照组。处理后致死的斜纹夜蛾幼虫肠道细菌群落多样性显著高于对照组;且处理后致死的斜纹夜蛾幼虫肠道细菌群落组成与对照组差异显著。【结论】金龟子绿僵菌对斜纹夜蛾幼虫的致死率和致死效率与金龟子绿僵菌的浓度呈正相关;斜纹夜蛾幼虫体内的抗氧化酶可能在抵抗金龟子绿僵菌侵染的过程中起重要作用。金龟子绿僵菌的侵染会导致斜纹夜蛾幼虫肠道细菌群落多样性升高和组成发生变化,Enterococcus、Escherichia和Pseudomonas等属可能是影响斜纹夜蛾幼虫抵抗金龟子绿僵菌侵染致死的重要因素。

关键词：金龟子绿僵菌斜纹夜蛾幼虫抗氧化酶活性肠道细菌群落结构

金龟子绿僵菌CQMa128新制剂对花生蛴螬的田间防控效果

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植物保护 2012年第3期38卷 162-167页

作者：殷幼平申剑飞时玉娟刘美昌邵长文王中康重庆大学生物工程学院重庆市杀虫真菌农药工程技术中心重庆400030 山东省日照市植保站日照276800

为明确金龟子绿僵菌CQMa128微粒剂和乳粉剂对花生蛴螬的田间防治效果,设计随机区组小区试验,采用绿僵菌微粒剂在花生播种期防治上一年的3龄蛴螬老熟幼虫;采用绿僵菌乳粉剂在花生幼果期防治当年的1～2龄蛴螬。同期调查绿僵菌新制剂的施... 详细信息

为明确金龟子绿僵菌CQMa128微粒剂和乳粉剂对花生蛴螬的田间防治效果,设计随机区组小区试验,采用绿僵菌微粒剂在花生播种期防治上一年的3龄蛴螬老熟幼虫;采用绿僵菌乳粉剂在花生幼果期防治当年的1～2龄蛴螬。同期调查绿僵菌新制剂的施用对蛴螬主要天敌臀钩土蜂的影响。金龟子绿僵菌CQMa128微粒剂(最适剂量375kg/hm2)施药后30～40d,平均校正防效为75.58%～80.03%;金龟子绿僵菌CQMa128乳粉剂(最适剂量7.5kg/hm2)施药后15～20d,平均校正防效为77.59%～86.46%。花生果荚收获期平均保果率达85.76%～87.13%,花生果荚鲜重平均增产量达832.5～916.4kg/hm2,控害保产效果显著。且绿僵菌新制剂的施用对臀钩土蜂的存活未见有明显不良影响。表明金龟子绿僵菌CQMa128新制剂能够对田间花生蛴螬进行持续有效的防控。

关键词：金龟子绿僵菌蛴螬微粒剂乳粉剂生物防治

金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae HN1)几丁质酶基因的克隆及高效表达

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中国生物工程杂志 2006年第7期26卷 31-36页

作者：任文彬张世清黄俊生中国热带农业科学院环境与植物保护研究所热带作物生物技术国家重点实验室海口571101

几丁质酶是昆虫病原真菌金龟子绿僵菌致病力的主要因子之一。用RT-PCR方法,从分离筛选到的高毒力金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae伽HN1中,扩增得到几丁质酶基因全长,此基因全长为1275bp,登录号为DQ011865,经Blastn分析此基因序列与*... 详细信息

几丁质酶是昆虫病原真菌金龟子绿僵菌致病力的主要因子之一。用RT-PCR方法,从分离筛选到的高毒力金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae伽HN1中,扩增得到几丁质酶基因全长,此基因全长为1275bp,登录号为DQ011865,经Blastn分析此基因序列与*** E6的chi1基因(AFD2749)同源率为96％。以pET-22b(+)为基础载体,构建pET-chi重组表达载体,在大肠杆菌(Escherichia coli)BL 21中进行表达。经SDS-PAGE分析,获得了42kDa大小的重组目的蛋白,目的蛋白占表达总蛋白含量的63．3％。菌体经冷冻与超声波破碎后,按DNS法可测得几丁质酶的活性。

关键词：金龟子绿僵菌几丁质酶基因大肠杆菌

金龟子绿僵菌对黄曲条跳甲体内保护酶活性的影响

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植物保护 2022年第5期48卷 129-133,157页

作者：蒋春艳龙岩市农业科学研究所福建龙岩364000

为探索绿僵菌对黄曲条跳甲保护酶活性的影响,分别用浓度为1×10^(8)、2×10^(8)、4×10^(8)、8×10^(8)、1.6×10^(9)个/mL的金龟子绿僵菌CQMa421孢子悬浮液处理黄曲条跳甲成虫,对侵染后黄曲条跳甲体内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(... 详细信息

为探索绿僵菌对黄曲条跳甲保护酶活性的影响,分别用浓度为1×10^(8)、2×10^(8)、4×10^(8)、8×10^(8)、1.6×10^(9)个/mL的金龟子绿僵菌CQMa421孢子悬浮液处理黄曲条跳甲成虫,对侵染后黄曲条跳甲体内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性进行了研究。结果表明:处理后120 h内,SOD活性先升高后降低,48 h时SOD活性达最高,分别为69.5、72.5、74.5、75.9、76.7 U/g,SOD活性与孢子悬浮液浓度呈正相关;各处理POD活性在处理后72 h时开始上升,96 h时活性最高,分别为1 020、1 066.67、1 240、1 086.67、1 166.67 U/g,分别为对照组的3.33、3.48、4.04、3.54倍和3.80倍,随后开始下降;CAT活性变化总体趋势为上升—下降—上升—下降;3种酶活性最后都恢复至对照组水平,各处理组最大值间差异显著,且显著高于对照组,表明3种保护酶在黄曲条跳甲抵御金龟子绿僵菌入侵过程中均做出了应激反应。

关键词：金龟子绿僵菌黄曲条跳甲超氧化物歧化酶过氧化物酶过氧化氢酶

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金龟子绿僵菌对棉花枯萎病菌的拮抗作用研究

棉花学报 2010年第6期22卷 591-596页

作者：齐永霞陈方新李增智安徽农业大学植物保护学院合肥230036 安徽农业大学微生物防治省重点实验室合肥230036

在实验室条件下,研究了虫生真菌金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)对棉花枯萎病菌尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporium ***)的拮抗作用及其机制。对峙培养结果表明,金龟子绿僵菌的3个供试菌株对3株枯萎病菌均有抑制作用,其中以Ma55抑制... 详细信息

在实验室条件下,研究了虫生真菌金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)对棉花枯萎病菌尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporium ***)的拮抗作用及其机制。对峙培养结果表明,金龟子绿僵菌的3个供试菌株对3株枯萎病菌均有抑制作用,其中以Ma55抑制效果最好。在培养基中加入Ma55不同浓度的孢子悬浮液,当浓度为3.25×106 ***-1时,5 d后,对3株枯萎病菌菌丝生长的抑制率均超过70%。Ma55液体振荡培养20 d获得的无菌发酵液对3个枯萎病菌菌株菌丝生长的抑制率分别达到59.86%、56.99%和57.09%,对它们的分生孢子产生及分生孢子萌发也都具有显著的抑制作用。显微镜观察未发现金龟子绿僵菌与棉花枯萎病菌菌丝间有重寄生现象。上述结果显示,金龟子绿僵菌对供试棉花枯萎病菌的拮抗机制主要是营养竞争、空间竞争及抗生作用。

关键词：金龟子绿僵菌棉花枯萎病菌拮抗竞争抗生