敲减TLR2基因对结直肠癌细胞增殖的抑制作用及其机制

作     者：孟爽 李迎杰 臧晓珍 赵乾芳 张进 李静 MENG Shuang;LI Yingjie;ZANG Xiaozhen;ZHAO Qianfang;ZHANG Jin;LI Jing

作者机构：锦州医科大学附属第一医院消化内科辽宁锦州121000 

出 版 物：《吉林大学学报（医学版）》 (Journal of Jilin University：Medicine Edition)

年 卷 期：2020年第46卷第2期

页      面：316-322页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：辽宁省科技厅自然科学基金资助课题(20170540391) 辽宁省科技厅科研基金资助课题(2013020126-215) 

主　　题：结直肠肿瘤 Toll样受体2基因 细胞增殖 细胞周期 

摘      要：目的:应用慢病毒RNA干扰技术敲减结直肠癌细胞中Toll样受体2(TLR2)基因,探讨其对结直肠癌细胞增殖的作用,并阐明其作用机制。方法:将处于对数生长期的结直肠癌HCT116细胞和HT29细胞分为未感染对照组、阴性对照组及基因敲减组(TLR2-RNAi组),分别给予无慢病毒感染、慢病毒RNAi及慢病毒TLR2-RNAi稳定转染。感染后采用蛋白印迹法检测各组细胞中TLR2蛋白表达水平,采用CCK-8法和流式细胞术检测各组细胞增殖活性及不同细胞周期细胞百分率,蛋白印迹法检测各组细胞中磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶(PI3K/Akt)和核因子κB(NF-κB)细胞信号通路相关蛋白及细胞周期相关蛋白cyclin D1、cyclin D3蛋白表达水平。结果:与未感染对照组和阴性对照组比较,TLR2-RNAi组HCT116细胞和HT29细胞中TLR2蛋白表达水平明显降低(P0.01)。与未感染对照组和阴性对照组比较,TLR2-RNAi组HCT116细胞和HT29细胞增殖活性明显降低(P0.05),S期和G 2期细胞百分率明显降低(P0.05),G 1期细胞百分率明显升高(P0.05)。与未感染对照组和阴性对照组比较,TLR2-RNAi组HCT116细胞和HT29细胞中PI3K、p-Akt、p-NF-κβ、cyclin D1和cyclin D3蛋白表达水平明显降低(P0.01)。结论:敲减TLR2基因可以通过调控PI3K/Akt和NF-κB细胞信号通路及细胞周期相关蛋白cyclin D1和cyclin D3的表达而抑制结直肠癌细胞的增殖。