A-T克隆法对β-神经生长因子前体基因的克隆及分析

作     者：舒红 任常山 

作者机构：中国医科大学肿瘤研究所分子肿瘤研究室辽宁沈阳110001 

出 版 物：《中国医科大学学报》 (Journal of China Medical University)

年 卷 期：2002年第31卷第5期

页      面：321-323页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家科技部"863"高技术发展计划重大项目(Z2 0 -0 4-0 2 ) 

主　　题：β-神经生长因子 PCR方法 A-T克隆 

摘      要：目的 :对人含前导肽的神经生长因子 (β NGF)基因序列进行体外扩增、克隆及分析鉴定 ,为其在真核细胞中表达并获得具有神经生长因子活性的蛋白及临床应用打下基础。方法 :用一对特异引物 ,采用PCR技术 ,从人胎盘DNA基因组中扩增出含前导肽及信号肽的 β NGF基因序列 ;用A T克隆法 ,与pGEM T载体连接 ,经筛选得到重组质粒 pGEM Tβ NGF ,用酶切、PCR法及序列分析进行鉴定。 结果 :1.2 %的琼脂糖凝胶电泳显示在预期位置出现阳性条带。结论 :重组质粒pGEM Tβ NGF成功 ,克隆基因序列正确 ,此方法各环节可靠。